产品介绍：

       炎症免疫反应需要白细胞在外来损伤时募集到炎症部位。趋化因子是一种小的趋化肽，为细胞运输提供方向性线索，因此对保护宿主反应至关重要。此外，趋化因子调节造血细胞过多的生物过程，引导细胞活化、分化和存活。

       趋化因子受体是在某些细胞表面发现的细胞因子受体，与一种称为趋化因子的细胞因子相互作用。在相互作用后，这些受体触发细胞内钙流量，从而导致趋化性。

       沃吉基因趋化因子和受体PCR阵列包括含CXC趋化因子受体、CC趋化因子受体、CX3C趋化因子受体和XC趋化因子受体不同家族成员的基因、等关键的90个基因。

       WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Chemokines & Receptors PCR Array plate
种    属：	Rat
货    号：	WC-MRNA0033-R
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Rat

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Ackr2

C5

C5ar1

Ccl11

Ccl12

Ccl17

Ccl19

Ccl2

Ccl20

Ccl21

Ccl22

Ccl24

B

Ccl25

Ccl28

Ccl3

Ccl4

Ccl5

Ccl6

Ccl7

Ccl9

Ccr1

Ccr10

Ccr1l1

Ccr2

C

Ccr3

Ccr4

Ccr5

Ccr6

Ccr7

Ccr8

Ccr9

Ccrl2

Cd40

Cklf

Cmklr1

Cmtm2a

D

Cmtm3

Cmtm5

Cx3cl1

Cx3cr1

Cxcl1

Cxcl10

Cxcl11

Cxcl12

Cxcl13

Cxcl14

Cxcl16

Cxcl2

E

Cxcl3

Cxcl5

Cxcl9

Cxcr1

Cxcr2

Cxcr3

Cxcr4

Cxcr5

Cxcr6

Cxcr7

Fgf2

Fpr1

F

Gpr17

Hif1a

Ifng

Il10

Il16

Il1b

Il4

Il5ra

Il6

Il6r

Il6st

Il7r

G

Il9r

Itgam

Itgb2

Kdr

Mapk1

Mapk14

Pf4

Plau

Ppbp

Prkca

Slit2

Tgfb1

H

Tlr2

Tlr4

Tnf

Tymp

Vegfa

Xcl1

Actb

Gapdh

Hprt1

Ubb

NTC

NTC

基因分类（Rat）	相关基因
趋化因子	α-趋化因子（CXC基序）Cxcl1，Cxcl10，Cxcl11，Cxcl12，Cxcl13，Cxcl14，Cxcl16，Cxcl2，Cxcl3，Cxcl9。趋化因子 （CC基序） Ccl11，Ccl12，Ccl17，Ccl19，Ccl2，Ccl20，Ccl21，Ccl22，Ccl24，Ccl25，Ccl28，Ccl3，Ccl4，Ccl5，Ccl6，Ccl7，Ccl9。γ-趋化因子（C基序）Xcl1。[δ]-趋化因子（CX3C基序）Cx3cl1。
趋化因子受体	α-趋化因子（CXC基序）Cxcr1、Cxcr2、Cxcr3、Cxcr4、Cxcr5、Cxcr6。趋化因子（CC基序） Ccr1、Ccr10、Ccr1l1、Ccr2、Ccr3、Ccr4、Ccr5、Ccr6、Ccr7、Ccr8、Ccr9。[δ]-趋化因子（CX3C基序） Cx3cr1。非典型趋化因子受体 ACKR2、Ccrl2
趋化细胞因子	C5、Cklf、Cmtm2a、Cmtm3、Cmtm5、Fgf2（bFGF）、Ifng、Il10、Il16、Il1b、Il4、Il6、Pf4、Ppbp、Tgfb1、Tnf、 Vegfa
趋化细胞因子受体	C5ar1、Cmklr1、Fpr1、Gpr17

趋化因子和受体通路图

 

 

图片来源于：https://reactome.org/PathwayBrowser/#/R-HSA-380108

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.