产品介绍：

细胞因子是主要由免疫细胞分泌的小信号蛋白，在免疫应答期间激活细胞间和细胞内信号。历史上，细胞因子在功能上分为两个家族：淋巴因子/白细胞介素和趋化因子。免疫细胞释放的所有细胞因子称为淋巴因子/白细胞介素，而趋化性细胞因子则称为趋化因子。然而，这些家族描述不再准确，因为一些生长因子和激素也表现出与细胞因子家族成员非常相似的细胞效应。除了免疫细胞外，许多不同的细胞类型表达细胞因子以刺激免疫反应、炎症和其他过程。细胞因子释放的最终效果取决于表达特定细胞因子受体的活化细胞类型。该阵列包括常见细胞因子家族以及具有细胞因子样特性的生长因子和激素。该阵列的结果将增强对各种细胞类型的免疫反应的理解。

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Cytokines & Chemokines PCR Array
种    属：	HUMAN
货    号：	wc-mRNA0038-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ADIPOQ

IL9

CXCL5

BMP4

LTA

FASLG

BMP7

MIF

IFNA2

CCL11

NODAL

IL10

B

CCL17

PF4

IL12A

CCL19

SPP1

IL13

CCL20

THPO

IL16

CCL22

TNFRSF10A

IL17F

C

CCL3

TNFRSF10C

IL1A

CCL7

TNFRSF11A

IL1RN

CD40LG

TNFRSF12A

IL21

CSF1

TNFSF11

IL5

D

CSF3

VEGFA

IL27

CXCL1

IL23A

IL4

CXCL11

OSM

IL6

CXCL13

TNFSF13B

CXCL12

E

CXCL2

BMP2

LIF

CXCL9

BMP6

LTB

GPI

CCL1

MSTN

IFNG

CCL13

TNFRSF10B

F

IL11

CCL18

PPBP

IL12B

CCL2

TGFB2

IL15

CCL21

TNF

IL17A

CCL24

IL7

G

IL18

CCL5

TNFRSF10D

IL1B

CCL8

TNFRSF11B

IL2

CNTF

TNFSF10

IL22

CSF2

CXCL16

H

IL24

CX3CL1

XCL1

IL3

CXCL10

IL8

ACTB

GAPDH

HPRT1

18S

NTC

NTC

基因分类（human）	相关基因
趋化因子	CCL1 ,CCL11,CCL13 ,CCL17 ,CCL18 ,CCL19,CCL2 ,CCL20 ,CCL21 ,CCL22 ,CCL24 ,CCL3,CCL5 ,CCL7 ,CCL8 , CX3CL1,CXCL1 ,CXCL10 ,CXCL11 ,CXCL12 (,CXCL13,CXCL16,CXCL2 ,CXCL5,CXCL9 ,PPBP,XCL1
白细胞间介素	CXCL8 ,IL10,IL11,IL12A,IL12B,IL13,IL15,IL16,IL17A,IL17F,IL18,IL1A,IL1B,IL1RN,IL2,IL21,IL22,IL23A,IL24,IL27,IL3,IL4,IL5,IL6,IL7,IL9
干扰素	IFNA2,IFNG
生长因子	BMP2,BMP4,BMP6,BMP7,CNTF,CSF1 ,CSF2 ,CSF3 ,GPI,LIF,MSTN,NODAL,OSM,THPO,VEGFA.
TNF受体超家族成员	CD40LG,FASLG,LTA ,LTB,TNF,TNFRSF11B,TNFSF10 ,TNFSF11 ,TNFSF13B
其他细胞因子	ADIPOQ ,MIF,SPP1,TGFB2
抗炎细胞因子	CCL18 ,CCL19,CCL21,IL10,IL11,IL12A,IL12B,IL13,IL18,IL2,IL22,IL23A,IL24,IL4,IL6,TGFB2

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.