产品介绍：

雌激素受体是在发育、生长和生殖中重要的类固醇激素受体。α和β这两种表征良好的内质网与细胞核中的多种共调节因子相互作用，并启动靶基因转录。内质网也可以与细胞膜结合，在那里它们激活下游信号通路。雌激素受体在女性器官癌，尤其是乳腺癌中起着重要作用。由于组织特异性内质网反应因激动剂或拮抗剂而异，内质网信号传导的机制尚不完全清楚。ER信号在哺乳动物系统中是重要的，而不是女性器官。该阵列包括内质网、它们的协同调节器和相互作用的蛋白质以及下游靶基因。

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Estrogen Receptor Signaling PCR Array plate
种    属：	Human
货    号：	WC-MRNA0058-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

AHR

BRCA1

CTSD

ESR1

FSHB

IGFBP5

MAFF

NCOA3

NR5A2

PTGS2

TFF1

WNT5A

B

AKAP1

C3

CYP19A1

ESR2

FSHR

IRS1

MED1

NCOR1

NRIP1

RALA

TGFA

XBP1

C

APBB1

CAV1

CYP1A1

ESRRA

FST

JUNB

MMP9

NCOR2

NRP1

RARA

TGFB3

NCOA2

D

BCAR1

CCL2

EBAG9

ESRRG

G6PD

KLK3

MTA1

NOV

PDZK1

S100A6

THBS1

NR3C1

E

BCL2L1

CCND1

EFNA5

FGF2

GPER1

L1CAM

MYC

NR0B1

PELP1

SAFB

VDR

PTCH1

F

BDNF

CITED2

EGR3

FOS

HSP90AA1

LGALS1

NAB2

NR0B2

PGR

SNAI1

VEGFA

SPP1

G

BMP4

CKB

ERBB2

FOXA1

IGF1

LPL

NCOA1

NR2F6

PHB2

SOCS3

WISP2

WNT4

H

BMP7

CTGF

ERBB3

FOXO1

IGFBP4

LTBP1

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

基因分类(Human）		相关基因
雌激素受体		ESR1,ESR2,GPER1.
雌激素受体辅因子和相互作用蛋白		AHR,BCAR1,BRCA1,CAV1,CCND1,EFNA5,ESR1,ESR2,HSP90AA1,IGF1,MED1,MTA1,NCOA1,NCOA2,NCOA3,NCOR1,NCOR2,NR0B1,NR0B2,NRIP1,PELP1,PGR,PHB2,SAFB,TFF1 ,VDR.
雌激素受体靶基因	女性性别差异	BCL2L1 ,FST,NRIP1,PGR,VEGFA,WNT4,WNT5A
	男性性别差异	BCL2L1 ,CCND1,CYP19A1,WNT4,WNT5A.
	排卵周期	BCL2L1,BMP4,ERBB2,FST,NRIP1,PGR,TGFB3,VEGFA,WNT5A
	妊娠	FOS,JUNB,PGR,PTGS2 ,SNAI1,SOCS3,SPP1,TGFB3,WNT4
	乳腺发育	BMP4,CAV1,CCND1,ERBB2,ERBB3,IGFBP5,IRS1,NR3C1,PGR,PTCH1,TGFB3,VEGFA,WNT4,WNT5A.
	心血管系统开发	C3,CAV1,CCL2 ,EGR3,ERBB2,ERBB3,JUNB,KLK3,MMP9,NRP1,PTCH1,PTGS2 ,RARA,SOCS3,TGFA,THBS1,VEGFA,WNT4,WNT5A
	神经系统发育	APBB1,BDNF,CCL2 ,CITED2,CKB,CYP19A1,EGR3,ERBB2,ERBB3,FOS,FOXA1,L1CAM,LGALS1,NAB2,NR2F6,NR3C1,NRP1,PTCH1,S100A6,SPP1,VEGFA,WNT4,WNT5A.
	骨骼发育	BMP4,BMP7,IGF1,IGFBP5,JUNB,MMP9,NAB2,PTGS2,SNAI1,SPP1,TGFB3,WNT4,WNT5A.
	生长调节	BMP7,CTGF,NOV,EBAG9,ERBB2,IGFBP4,IGFBP5,NRP1,PTCH1,SOCS3,SPP1,WNT5A
	转录因子	EGR3,FOS,FOXA1,JUNB,MAFF,MYC,NCOA1,NCOA3,NR3C1,NR5A2,NRIP1,PGR,RARA,SNAI1,XBP1
其他雌激素受体靶基因		AKAP1,CTSD,CYP1A1,G6PD,LPL,LTBP1,PDZK1,RALA,TFF1

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.