产品介绍

路径描述

       血管生成，即新血管的生长，在许多生理和病理过程中发挥着关键作用，如排卵、胚胎发生、伤口修复、炎症、恶性肿瘤生长、视网膜病变、类风湿性关节炎和血管生成依赖性疾病。血管生成的最佳特征调节剂之一是肝素结合的FGF（成纤维细胞生长因子）。FGF在体内诱导新生血管形成，并与伤口愈合和胚胎发生过程中新血管的生长有关。FGF还诱导细胞增殖、迁移和蛋白酶的产生，并调节内皮中整合素的表达。FGFR属于五个基因家族（FGFR1-5），从中选择性剪接产生不同的亚型，包括FGF3（或Int-2）、FGF4（或Kaposi FGF）、FGF5、FGF6、FGF7（或角质细胞生长因子）、FGF8（或雄激素诱导因子）和FGF9。这些受体在包括血管内皮在内的多个器官系统中广泛表达，这表明它们在许多稳态机制中发挥着功能作用。FGFs通过与FGFR结合向细胞核发出信号，并激活多种信号转导途径，包括Ras、MAPKs（有丝分裂原活化蛋白激酶）、ERKs（细胞外信号调节激酶）、Src、p38MAPKs、PLCγ（磷脂酶Cγ）、JNK（Jun N-末端激酶）和PKC（蛋白激酶C）。

       WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	FGF Pathway PCR Array plate
种    属：	Rat
货    号：	WC-MRNA0174-R
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

 

基因列表

Rat

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ATF2

FGF19

FGF7

HRAS

MAP2K4

MAPK1

MAPK9

PIK3CB

PLCG2

PRKCG

RAF1

SOS1

B

ELK1

FGF2

FGF8

ITPR1

MAP2K5

MAPK10

MRAS

PIK3CD

PLD1

PRKCH

RALA

SOS2

C

FGF1

FGF20

FGF9

ITPR2

MAP2K6

MAPK11

NRAS

PIK3R1

PLD2

PRKCI

RALB

PIK3CA

D

FGF10

FGF21

FGFR1

ITPR3

MAP3K1

MAPK12

PIK3C2A

PIK3R2

PLD3

PRKCQ

RALBP1

PLCG1

E

FGF12

FGF23

FGFR2

KRAS

MAP3K2

MAPK13

PIK3C2B

PIK3R3

PRKCA

PRKCZ

RALGDS

PRKCE

F

FGF13

FGF3

FGFR3

MAP2K1

MAP3K3

MAPK14

PIK3C2G

PIK3R4

PRKCB

PRKD1

RASA1

RAC1

G

FGF14

FGF4

GPLD1

MAP2K2

MAP3K4

MAPK3

PIK3C3

PIK3R5

PRKCD

PRKD3

RRAS

RRAS2

H

FGF17

FGF5

GRB2

MAP2K3

MAP3K5

MAPK8

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.