产品介绍：

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Hematopoiesis PCR Array plate
种    属：	Human
货    号：	WC-MRNA0073-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Abca15

ASH2L

CD27

CD8A

ETV6

HDAC7

IL25

KIT

NCOA6

PTPRC

STIM2

VEGFA

B

Acvr1b

BLNK

CD34

CEBPE

FLT3LG

HDAC9

IL31RA

KITLG

NOS2

RBPJ

TAL1

WNT3A

C

Acvr2a

CBFB

CD3D

CEBPG

FUT10

IL10

IL6ST

LEF1

NOTCH1

RUNX1

TEK

KDR

D

Adam17

CCR1

CD3G

CHST15

FZD1

IL11

INHA

LMO2

NOTCH2

SFXN1

TLR3

MMP9

E

Adam8

CD14

CD4

CSF1

GATA1

IL12B

INHBA

LRMP

NOTCH4

SOCS5

TLR4

PF4

F

Adar

CD164

CD44

CSF2

GATA2

IL1A

JAG1

MAL

PAX5

SPP1

TNFSF11

STAT3

G

ANGPT1

CD1D

CD80

DLL1

HDAC4

IL2

JAG2

MAP4K1

PECAM1

STAT1

TRIM10

VAV1

H

APC

CD2

CD86

ETS1

HDAC5

IL20

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

基因分类(Human）	相关基因
细胞表面和细胞谱系标记	CCR1,CD164,CD1D,CD2,CD27,CD34,CD3D,CD3G,CD4,CD44,CD80,CD86,CD8A,CHST15,CSF1,DLL1,FLT3LG,FUT10,FZD1,IL31RA,IL6ST,JAG1,JAG2,KDR,KIT,KITLG,LRMP,MAL,NOTCH2,NOTCH4,PECAM1,PTPRC,SFXN1,STIM2,TEK,TLR3,TLR4,TNFSF11.
细胞因子	CSF1,CSF2,FLT3LG,IL10,IL11,IL12B,IL1A,IL2,IL20,IL25,INHA,INHBA,PF4,SPP1,TNFSF11.
生长因子	CSF1,CSF2,IL10,IL11,IL1A,IL2,INHA,INHBA,JAG1,JAG2,KITLG,SPP1,VEGFA.
细胞周期停滞	INHA,INHBA,NOTCH2
细胞周期的其他调节因子	APC,HDAC4,HDAC5,HDAC7,HDAC9,IL1A,JAG2,STAT1,VEGFA.
B细胞活化	HDAC4,HDAC5,HDAC7,HDAC9.
T细胞活化	CD2,CD3D,CD3G,CD80,CD86,CD8A.
激活其他血细胞	CD2,IL11,IL12B,IL2,IL31RA,PF4,TLR4.
B-细胞分化	BLNK,CD27,CHST15,HDAC4,HDAC5,HDAC7,HDAC9,IL10,IL11,INHA,INHBA
T-细胞分化	CD2,CD27,CD4,CD80,CD86,IL12B,IL2,JAG2,NOS2 ,SOCS5.
其他血细胞类型的分化	ANGPT1,CD3G,CSF1,DLL1,IL11,IL20,IL31RA,INHA,INHBA,JAG1,MAL,MAP4K1,NCOA6,NOTCH1,NOTCH2,NOTCH4, PAX5,PF4,SPP1,TAL1,TLR3,TLR4,TNFSF11
造血调节剂	ASH2L,CD164,CSF1,DLL1,FUT10,IL10,IL20,IL31RA,JAG1,LMO2,MMP9,NOTCH2,NOTCH4,STIM2,TRIM10.
Notch信号	DLL1,JAG1,JAG2,NOTCH2,NOTCH4
WNT 信号	APC,FZD1,LEF1,WNT3A.
JAK / STAT信号	IL31RA,SOCS5,STAT1,STAT3.
细胞表面受体	CCR1,CD14,CD2,CD27,CD3D,CD3G,CD4,CSF2,FZD1,IL6ST,INHA,INHBA,PTPRC
转录因子和调节因子	ASH2L,CBFB,CD80,CD86,CEBPE,CEBPG,ETS1,ETV6,GATA1,GATA2,HDAC4,HDAC5,HDAC7,HDAC9,IL31RA,LEF1,NCOA6,NOTCH1,NOTCH2,NOTCH4,PAX5,RBPJ,RUNX1,STAT1,STAT3,TAL1,VAV1.

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.