产品介绍：

     白细胞介素17（IL-17）家族是由IL-17A-F组成的细胞因子亚群，在急性和慢性炎症反应中发挥着至关重要的作用。IL-17A是新定义的T辅助细胞17（TH17）亚群的标志性细胞因子，在保护宿主免受细胞外病原体感染方面发挥着重要作用，但也促进自身免疫性疾病的炎症病理，而IL-17F主要参与粘膜宿主防御机制。IL-17E（IL-25）是Th2免疫应答的放大器。IL-17C具有与IL-17A相似的生物学功能。IL-17B和IL-17D的功能在很大程度上仍然难以捉摸。IL-17家族通过其相应的受体发出信号，并激活包括NF-κB、MAPKs和C/EBPs在内的下游通路，以诱导抗菌肽、细胞因子和趋化因子的表达。受体近端接头Act1（一种NF-κB激活剂1）被认为是IL-17A信号传导中的主要介质。Act1可能是一种常见的信号适配器，也由该家族中的其他成员介导的信号共享。

     WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	IL17 Signaling PCR Array plate
种    属：	Human
货    号：	WC-MRNA0217-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

AKT1

CCL2

CXCL1

FADD

IKBKG

IL17RB

ELAVL1

MAP3K8

MMP9

S100A8

TNFAIP3

TRAF6

B

ANAPC5

CCL20

CXCL10

FOS

IL13

IL17RC

IRF3

MAPK1

MUC5AC

S100A9

TNFSF11

USP25

C

CASP3

CCL7

CXCL2

GSK3B

IL17A

IL17RD

JUN

MAPK14

MUC5B

SRSF1

TRADD

MAP3K7

D

CASP7

CEBPB

CXCL3

HSP90AA1

IL17B

IL17RE

KLK1

MAPK3

NFKB1

SYK

TRAF2

MMP3

E

CASP8

CEBPD

CXCL5

HSP90AB1

IL17C

IL1B

LCN2

MAPK7

PTGS2

TAB2

TRAF3

S100A7

F

CASP9

CSF1

CXCL6

IFNG

IL17D

IL4

MAP2K5

MMP1

REL

TAB3

TRAF3IP2

TNF

G

CCL11

CSF2

CXCL8

IKBKB

IL17F

IL5

MAP3K3

MMP13

RELA

TBK1

TRAF4

TRAF5

H

CCL17

CSF3

DEFB1

IKBKE

IL17RA

IL6

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

IL17通路图：

图片来源于：https://www.genome.jp/kegg-bin/show_pathway?map04657

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.