产品介绍：

       沃吉基因先天性和适应性免疫反应PCR阵列包括与IL-1R和Toll样受体（TLR）信号传导途径相关的基因，还包括参与病原体检测的IL-1R和TLR基因。该阵列上表示与宿主防御细菌有关的基因，包括参与细菌检测的基因，以及参与急性期反应，补体激活，炎症反应和抗菌体液反应的基因等。

       WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Innate & Adaptive Immune Responses PCR Array plate
种    属：	Mouse
货    号：	WC-MRNA0082-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Mouse

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Apcs

Ccr5

Cd86

Foxp3

Ifnb1

Il1a

Il6

Lyz2

Nfkb2

Stat1

Tlr3

Traf6

B

C3

Ccr6

Cd8a

Gata3

Ifng

Il1b

Irak1

Mapk1

Nfkbia

Stat3

Tlr4

Tyk2

C

C5ar1

Ccr8

Crp

H2-q10

Ifngr1

Il1r1

Irak2

Mapk8

Nlrp3

Stat4

Tlr5

Ly96

D

Casp1

Cd14

Csf2

H2-t23

Ifngr2

Il1r2

Irf3

Mbl2

Nod1

Stat6

Tlr6

Nfkb1

E

Casp4

Cd4

Cxcl10

Icam1

Il10

Il2

Irf7

Mpo

Nod2

Tbx21

Tlr7

Slc11a1

F

Ccl12

Cd40

Cxcr3

Ifna1

Il13

Il23a

Itgam

Mx1

Rag1

Ticam1

Tlr8

Tlr2

G

Ccl5

Cd40lg

Ddx58

Ifna2

Il17a

Il4

Jak2

Myd88

Rorc

Tlr1

Tlr9

Tnf

H

Ccr4

Cd80

Fasl

Ifnar1

Il18

Il5

Actb

Gapdh

Hprt1

B2m

NTC

NTC

基因分类（Mouse）		相关基因
先天免疫	模式识别受体	Ddx58,Nlrp3,Nod1,Nod2,Tlr1,Tlr2,Tlr3,Tlr4,Tlr5,Tlr6,Tlr7,Tlr8,Tlr9
	细胞因子	Ccl12,Ccl5,Csf2 ,Cxcl10 ,Ifna2,Ifnb1,Il18,Il1a,Il1b,Il2,Tnf.
其他先天免疫		Apcs,C3,C5ar1,Casp1,Cd14,Cd4,Cd40,Cd40lg,Cd8a,Crp,H2-Q10,H2-T23,Il1r1,Irak1,Irf3,Irf7,Itgam,Ly96,Lyz2,Mapk1,Mapk8 ,Mbl2,Mpo,Mx1,Myd88,Nfkb1,Nfkbia,Stat1,Ticam1,Traf6
适应性免疫	Th1标记和免疫	Ccr5,Cd80,Cxcr3,Ifng,Il18,Il23a,Slc11a1,Stat4,Tbx21,Tlr4,Tlr6
	Th2标记物和免疫反应	Ccr4,Ccr8,Cd86,Gata3,Ifnb1,Il10,Il13,Il18,Il4,Il5,Il6,Nod2,Stat6
	Th17标记	Ccr6,Il17a,Rorc,Stat3
	Treg 标记	Ccr4,Ccr8,Foxp3,Il10
	T细胞活化	Cd80,Cd86,Icam1,Ifng,Il23a,Il6,Slc11a1
	细胞因子	Ccl12 ,Ccl5,Csf2,Cxcl10,Ifna2,Ifng,Il10,Il13,Il17a,Il18,Il2,Il23a,Il4,Il5,Il6,Tnf
其他适应性免疫基因		Cd4,Cd40,Cd40lg,Cd8a,Crp,Fasl,H2-Q10,Ifnar1,Ifngr1,Il1b,Il1r1,Irf3,Irf7,Itgam,Jak2,Mapk8,Mbl2,Mx1,Nfkb1,Rag1,Stat1
体液免疫		C3,C5ar1,Ccl12,Ccr6,Crp,Ifnb1,Ifng,Il6,Mbl2,Nod2,Tnf
炎症反应		Apcs,C3,Ccl5 ,Crp,Foxp3,Il1a,Il1b,Il4,Il6,Mbl2,Stat3,Tnf
对细菌的防御反应		C5ar1,Ifnb1,Ifng,Il23a,Il6,Lyz2,Mbl2,Myd88,Nod1,Nod2,Slc11a1,Tlr1,Tlr3,Tlr4,Tlr6,Tlr9,Tnf.
对病毒的防御反应		Cd4,Cd40,Cd86,Cd8a,Cxcl10,Ddx58,H2-Q10,Ifnar1,Ifnb1,Il23a,Il6,Irf3,Nlrp3,Ticam1,Tlr3,Tlr7,Tlr8,Tyk2

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.