产品介绍：

       间充质干细胞（MSC）是能够分化成多种细胞类型的多能成体干细胞，例如成骨细胞，软骨细胞，肌细胞，脂肪细胞和β胰岛细胞。因为MSC可以很容易地从各种组织中分离出来并在体外扩增，所以它们可以作为再生医学的宝贵资源。然而，不同的MSC分离方案使得难以比较实验室之间的结果。使用此PCR阵列检查基因表达谱可以帮助您更好地解释初始MSC分离株的性质及其行为。 

       WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

 

产品内容

品    名：	Mesenchymal Stem Cell PCR Array plate
种    属：	Mouse
货    号：	WC-MRNA0098-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Mouse

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Abcb1a

Bmp4

Csf3

Fut4

Hdac1

Il6

Kdr

Ngfr

Prom1

Smurf2

Tgfb1

Wnt3a

B

Ackr3

Bmp6

Ctnnb1

Fzd9

Hgf

Ins2

Kitl

Notch1

Ptk2

Sox2

Tgfb3

Zfp42

C

Alcam

Bmp7

Egf

Gdf15

Hnf1a

Itga6

Lif

Nt5e

Ptprc

Sox5

Thy1

Nes

D

Anpep

Casp3

Eng

Gdf5

Icam1

Itgav

Ltbp3

Nudt6

Rhoa

Sox6

Tnf

Pparg

E

Anxa5

Ccne1

Erbb2

Gdf6

Ifng

Itgax

Mcam

Pdgfrb

Runx2

Sox9

Vcam1

Smurf1

F

Bdnf

Cd44

Fgf10

Gdf7

Igf1

Itgb1

Mitf

Pigs

Slc17a5

Tbp

Vegfa

Tert

G

Bglap

Col1a1

Fgf2

Gtf3a

Il10

Jag1

Mmp2

Pou5f1

Smad4

Tbx5

Vim

Vwf

H

Bmp2

Csf2

Fut1

Hat1

Il1b

Kat2b

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

   

基因分类（Mouse）		相关基因
干性标记		Fgf2,Ins2,Lif,Pou5f1,Sox2,Tert,Wnt3a,Zfp42
间充质干细胞特异性标记物		Alcam,Anpep,Bmp2,Casp3,Cd44,Eng,Erbb2 ,Fut4,Fzd9,Itga6,Itgav,Kdr,Mcam,Ngfr,Nt5e,Pdgfrb,Prom1,Thy1,Vcam1
其他间充质干细胞基因		Anxa5,Bdnf,Bglap,Bmp7,Col1a1,Csf2 ,Csf3,Ctnnb1,Egf,Fut1,Gtf3a,Hgf,Icam1,Ifng,Igf1,Il10,Il1b,Il6,Itgb1,Kitl ,Mitf,Mmp2,Nes,Nudt6,Pigs,Ptprc,Slc17a5,Tgfb3,Tnf,Vegfa,Vim,Vwf
间充质干细胞分化标记物	成骨	Bmp2,Bmp6,Fgf10,Hdac1,Hnf1a,Kdr ,Ptk2,Runx2,Smurf1,Smurf2,Tbx5
	脂肪生成	Pparg,Rhoa,Runx2
	软骨形成	Abcb1a,Bmp2,Bmp4,Bmp6,Gdf5 ,Gdf6,Gdf7,Hat1,Itgax,Kat2b,Sox9,Tgfb1
	肌生成	Jag1,Notch1
	肌腱发生（肌腱发育）	Bmp2,Gdf15,Smad4,Tgfb1

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.