产品介绍：

       线粒体拥有自身的遗传物质和遗传体系，但其基因组大小有限，是一种半自主细胞器。除了为细胞供能外，线粒体还参与诸如细胞分化、细胞信息传递和细胞凋亡等过程，并拥有调控细胞生长和细胞周期的能力。沃吉基因线粒体PCR阵列不仅包括电子传输链和氧化磷酸化所需的代谢物的线粒体分子传输的调节剂和介体基因，还包括维持线粒体膜极化所需的离子和对ATP合成重要的潜力基因。

       WCGENE®PCRArrayPlate操作简单。只需要将cDNA与qPCRmix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

 

产品内容

品    名：	Mitochondria PCR Array plate
种    属：	Human
货    号：	WC-MRNA0097-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ABHD11

BCL2

CPT2

IMMP1L

MTX2

SLC25A10

SLC25A2

SLC25A3

STARD3

TIMM23

TOMM34

UCP3

B

ACAD9

BCL2L1

DNM1

IMMP2L

OPA1

SLC25A12

SLC25A20

SLC25A30

TAZ

TIMM44

TOMM40

UXT

C

ACO1

BID

DNM1L

LRPPRC

PMAIP1

SLC25A13

SLC25A21

SLC25A31

TBP

TIMM50

TOMM40L

SLC25A27

D

ACO2

BNIP3

FIS1

MFN1

RHOT1

SLC25A14

SLC25A22

SLC25A37

TIMM10

TIMM8A

TOMM70A

SOD2

E

AIFM2

CDKN2A

GRPEL1

MFN2

RHOT2

SLC25A15

SLC25A23

SLC25A4

TIMM10B

TIMM8B

TP53

TIMM22

F

AIP

COX10

GSTP1

MIPEP

SFN

SLC25A16

SLC25A24

SLC25A5

TIMM17A

TIMM9

TSPO

TOMM22

G

BAK1

COX18

HSP90AA1

MPV17

SH3GLB1

SLC25A17

SLC25A25

SOD1

TIMM17B

TOMM20

UCP1

UCP2

H

BBC3

CPT1B

HSPD1

MSTO1

SLC25A1

SLC25A19

ACTB

GAPDH

HPRT1

18S

NTC

NTC

基因分类(Human)	相关基因
膜极化和电位	BAK1,BCL2,BCL2L1,BNIP3,SOD1,TP53,UCP1,UCP2,UCP3
线粒体运输	AIP,BAK1,BCL2,BCL2L1,BNIP3,CPT1B,CPT2,GRPEL1,HSP90AA1,HSPD1,IMMP2L,MFN2,MIPEP,MTX2,STARD3,TIMM10B, TP53 ,TSPO,UCP1,UCP2,UCP3
小分子运输	SLC25A1,SLC25A10,SLC25A12,SLC25A13,SLC25A14,SLC25A15,SLC25A16,SLC25A17,SLC25A19,SLC25A2,SLC25A20, SLC25A21,SLC25A22,SLC25A23,SLC25A24,SLC25A25,SLC25A27,SLC25A3,SLC25A30,SLC25A31,SLC25A37,SLC25A4, SLC25A5
线粒体靶向蛋白	AIP,GRPEL1,HSPD1,IMMP2L,MFN2,MIPEP,TIMM10B,TSPO
线粒体蛋白质导入	AIP,COX10,COX18,GRPEL1,HSPD1,MIPEP,SH3GLB1,TIMM10B
外膜易位	TOMM20,TOMM22,TOMM34,TOMM40,TOMM40L,TOMM70
内膜易位	IMMP1L,IMMP2L,OPA1,TAZ,TIMM10,TIMM10B,TIMM17A,TIMM17B,TIMM22,TIMM23,TIMM44,TIMM50,TIMM8A,TIMM8B,TIMM9
线粒体裂变与融合	COX10,COX18,FIS1,MFN1,MFN2,OPA1
线粒体定位	DNM1L,LRPPRC,MFN2,MSTO1,OPA1,RHOT1,RHOT2,UXT
细胞凋亡	AIFM2,BAK1,BBC3,BCL2,BCL2L1 ,BID,BNIP3,CDKN2A,DNM1L,MPV17,PMAIP1,SFN ,SH3GLB1,SOD2,TP53

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.