产品介绍

      分枝杆菌感染通常是细胞介导免疫缺陷患者的潜在长期并发症，并往往发展为亚急性。结核分枝杆菌感染的风险在很大程度上取决于患者的种族背景和原籍国，对于具有细胞介导的免疫缺陷、来自高危种族背景的斑片状或结节性肺部阴影的高危患者，应考虑使用结核病。非结核分枝杆菌感染（例如堪萨斯分枝杆菌或鸟分枝杆菌细胞内复合物）是免疫功能受损患者罕见的并发症。通过阴性培养排除诊断所花费的时间太长，对进行性疾病患者的临床有用。因此，如果临床上怀疑分枝杆菌感染，有必要进行侵入性调查，通过鉴定抗酸杆菌或特定的组织学变化来获得快速诊断的材料。治疗采用标准的化疗方案。

      WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Mycobacterium infections PCR Array plate
种    属：	Mouse
货    号：	WC-MRNA0242-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Mouse

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ADRB2

C1QB

ERCC5

HAMP

IFNG

KLRK1

NOD2

PHF17

SERPING1

STAT5A

TLR4

WARS

B

AIFM1

CCL2

F2R

HIF1A

IL10

LCN2

NPM1

PYCARD

SIAH1

TAPBP

TLR5

WRN

C

AIM2

CD68

FASLG

HSPA9

IL1B

MAGEA1

NR1H3

RAB24

SIRT1

TBP

TLR6

PERP

D

BNIP3

CEBPB

FOXP3

IDO1

IL23A

MARCO

NR2C2

RABEP1

SON

TCIRG1

TNF

SERPINA1

E

BNIP3L

CXCR4

GBP1

IFI16

IRF7

MMP25

NUP62

RAD21

SP110

TFF2

TPM1

STAT1

F

BPI

DNAJB6

GBP2

IFI27

ISG15

MPO

OAS1

SCARB2

SPP1

TGFB1

TRAF5

TLR2

G

BTG1

DNASE1L3

GZMA

IFI6

KLF2

MYD88

PARK7

SELP

STAB1

TLR1

TRIM21

TRIM22

H

C1QA

EIF2AK3

GZMB

IFIT3

KLRC3

NLRC5

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.