产品介绍

描述

      人类成骨细胞PCR阵列检测90个基因的表达与成骨分化有关。这个阵列包含在骨骼系统的发育以及骨矿物质代谢。生长因子以及介导成骨和相关细胞生长、增殖的基因，以及包括分化过程。还代表了细胞外基质参与骨骼发育的分子和细胞粘附分子。使用实时PCR，您可以轻松可靠地分析与该阵列的成骨分化。

      WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Osteogenesis PCR Array plate
种    属：	Mouse
货    号：	WC-MRNA0202-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Mouse

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Bglap

Bmp1

Bmp2

Bmp3

Bmp4

Bmp5

Bmp6

Bmp7

Calcr

Ccn2

Col10a1

Col11a1

B

Col12a1

Col14a1

Col15a1

Col16a1

Col1a1

Col1a2

Col2a1

Col3a1

Col4a3

Col5a1

Col7a1

Col9a2

C

Comp

Csf1

Csf2

Csf3

Dkk1

Dlx5

Dmp1

Egf

Egfr

Enam

Fgf1

Fgf2

D

Fgf3

Fgfr1

Fgfr2

Flt1

Fos

Gdf10

Hif1a

Igf1

Igf1r

Igf2

Igfbp3

Minpp1

E

Mmp2

Mmp8

Mmp9

Msx1

Msx2

Nkx3-2

Pdgfa

Pdgfrb

Pgk1

Phex

Pparg

Ppia

F

Ptgs2

Runx2

Smad1

Smad2

Smad3

Smad4

Smad5

Smad6

Smad7

Smad9

Sox5

Sox6

G

Sox9

Sp7

Sparc

Spp1

Tfip11

Tgfb1

Tgfb2

Tgfb3

Tgfbr1

Tgfbr2

Tnc

Tnf

H

Tnfrsf11b

Tuft1

Twist1

Vdr

Vegfa

Vegfb

Actb

Gapdh

Hprt

B2m

NTC

NTC

基因分类（mouse）		相关基因
SkeletalDevelopment	Cartilage Condensation	Bmp1,Bmpr1b (Alk6),Col2a1,Sox9.
	Ossification	Acvr1 (Alk2),Ahsg,Bglap,Bmp1,Bmp2,Bmp3,Bmp4,Bmp5,Bmp6,Bmp7,Bmpr1a (Alk3),Bmpr1b  (Alk6),Bmpr2,Cdh11,Chrd,Col1a1,Col2a1,Csf1 (Mcsf),Ctsk,Dlx5,Fgf2 (bFGF),Fgfr2,Gdf10  (Bmp3b),Gli1,Igf1,Igf1r,Ihh,Mmp2,Mmp8,Mmp9,Nog,Runx2,Smad1,Smad3,Sost,Sox9,Sp7, Spp1,Tgfb1,Tgfb2,Tgfb3,Tnfsf11 (Rankl),Twist1.
	OsteoclastDifferentiation	Bglap,Csf1 (Mcsf),Tnf,Tnfsf11 (Rankl).
	OsteoblastDifferentiation	Acvr1 (Alk2),Bglap,Bmp2,Bmp4,Bmp6,Bmp7,Bmpr1a (Alk3),Bmpr1b (Alk6),Bmpr2,Chrd,Col1a1, Dlx5,Fgf2 (bFGF),Fgfr2,Gdf10 (Bmp3b),Gli1,Igf1,Ihh,Nog,Runx2,Smad1,Smad3,Sp7,Spp1,Twist1.
	OtherSkeletal Development Genes	Alpl,Comp,Fgfr1,Tgfbr1 (ALK5),Tgfbr2,Tgfbr3.
BoneMineralMetabolism	BoneMineralization	Acvr1 (Alk2),Ahsg,Bglap,Bmp2,Bmp4,Bmp6,Bmp7,Bmpr1a (Alk3),Bmpr1b (Alk6),Bmpr2,Fgfr2, Igf1,Smad3,Sox9,Tgfb1,Tgfb3,Twist1.
	CalciumIonBinding&Homeostasis	Anxa5,Bglap,Cdh11,Comp,Egf,Fgf2 (bFGF),Itgav,Itgb1,Mmp2,Mmp8,Tgfb1,Vdr.
Cell Adhesion Molecules	Cell-Cell Adhesion	Bmp1,Bmpr1b (Alk6),Cdh11,Col14a1,Col2a1,Icam1,Ihh,Itgb1,Sox9,Tgfb1,Tnf,Tnfsf11 (Rankl),Vcam1.
	Cell-ExtracellularMatrix(ECM) Adhesion	Cd36,Col3a1,Csf1 (Mcsf),Itga2,Itga2b,Itga3,Itgam,Itgav,Itgb1,Smad3.
	OtherCellAdhesionMoleculesB	glap,Col5a1,Comp,Fn1,Tnf.
Growth Factors		Csf2 (GMCSF),Csf3 (Gcsf),Egf,Fgf1,Fgf2 (bFGF),Gdf10 (Bmp3b),Igf1,Pdgfa,Vegfa,Vegfb.
Transcription Factors		Gli1,Nfkb1,Runx2,Smad1,Smad2,Smad3,Smad4,Smad5,Sox9,Twist1.

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.