产品内容

品   名：	Plant heavy metal resistance gene PCR Array plate
种   属：	Arabidopsis
货   号：	WC-MRNA0291-A
规   格：	96孔板
品   牌：	Wcgene® biotech
产   品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储   存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Arabidopsis

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

AT5G64510

AT5G42830

AT5G19970

AT5G04730

AT4G28460

AT4G04330

AT3G47540

AT3G12510

AT2G36460

AT1G73480

AT1G60750

AT1G12200

B

AT5G64170

AT5G39580

AT5G14730

AT5G02490

AT4G28350

AT4G01440

AT3G46270

AT3G12320

AT2G35730

AT1G72940

AT1G51820

AT1G12080

C

AT5G53970

AT5G39110

AT5G13200

AT5G02230

AT4G25250

AT4G01140

AT3G32040

AT3G09440

AT2G23270

AT1G72900

AT1G35910

UBC

D

AT5G52790

AT5G26280

AT5G06760

AT4G40070

AT4G19810

AT3G62550

AT3G25790

AT3G09405

AT2G21640

AT1G72200

AT1G33340

ACT2

E

AT5G52750

AT5G26220

AT5G06730

AT4G39830

AT4G16447

AT3G59370

AT3G23880

AT3G07090

AT2G19310

AT1G72060

AT1G24800

ACT8

F

AT5G51440

AT5G25450

AT5G06610

AT4G39070

AT4G16260

AT3G50910

AT3G20015

AT3G02800

AT2G18670

AT1G71140

AT1G22500

TUB2

G

AT5G48000

AT5G20910

AT5G05340

AT4G37290

AT4G15420

AT3G48510

AT3G19030

AT2G48090

AT2G01900

AT1G61740

AT1G21440

NTC

H

AT5G42860

AT5G20820

AT5G05220

AT4G31910

AT4G15120

AT3G48450

AT3G12900

AT2G40900

AT1G76800

AT1G61340

AT1G14550

NTC

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.