产品介绍：

多囊肾病（PKD）代表大量进行性肾脏疾病，其特征在于肾脏的囊性扩张，导致进行性肾脏肿大和肾功能不全。最常见的PKD被遗传为常染色体显性或常染色体隐性性状。常染色体显性和隐性PKD的研究集中在囊肿发生的分子机制上，包括睫状体异常和细胞内钙失调，最终导致增殖，凋亡和去分化增加。在理解信号分子（例如环AMP，钙，整联蛋白和骨形态发生蛋白）以及血管生成，分化和促有丝分裂因子在肾囊肿发生和功能障碍中的作用方面的最新进展已经导致治疗干预的有趣可能性。用该阵列分析的基因与血管生成，促有丝分裂和炎症反应以及负责钙信号传导，初级纤毛功能和转录调节等的因子相关。

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

 

产品内容

品    名：	Polycystic Kidney Disease PCR Array plate
种    属：	HUMAN
货    号：	WC-MRNA0124-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

HUMAN

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ACY1

APOM

CLU

DNAH5

FGFR3

HRG

JAG1

NRP2

PIK3R1

PTGS2

SPRY1

WNT11

B

ADCY2

BCL2L1

COL12A1

DNAJB11

FN1

HSD11B2

JUN

NTRK3

PKD1

PTPRZ1

TBP

WT1

C

ADCY3

BMP2

COL3A1

DPEP1

FOSB

IFT88

KNG1

OSR2

PKD2

RET

TGFB3

NRG1

D

ADCY7

BMP4

CREBBP

DZIP1L

GANAB

IGF1R

LGALS3

P2RX7

PKHD1

RHOA

TMEM27

PIK3CA

E

AGXT2

BMP7

CXCL1

EDN1

GLI2

IL17D

MIOX

PCDH7

PRKCB

SCN5A

TPM1

PTGER3

F

ALDH8A1

CFD

CYP8B1

EGR3

GREM1

IL6

NAPSA

PCK1

PRLR

SLC26A7

UMOD

SLC5A10

G

ANGPT2

CLCNKA

CYS1

FBLN1

HGD

IL8

NOG

PDGFRA

PTGER2

SLC2A9

VEGFA

VGLL3

H

APOE

CLDN10

DAPL1

FGF1

HNF1B

ITGA8

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

基因分类(Human)	相关基因
血管生成生长因子	CXCL8 ,EDN1,NRP2,TPM1,VEGFA.
细胞凋亡	BCL2L1,DAPL1.
BMP/TGFβ/激活素信号传导	BMP2,BMP4,BMP7,GREM1,NOG,WNT11.
钙信号	PKD1,PKD2,SLC26A7,SLC2A9,SLC5A10.
cAMP信号	ACY1,ADCY2,ADCY3,ADCY7,CREBBP,P2RX7,PTGER2,PTGER3,PTGS2.
肾单位细分	ANGPT2,APOE,APOM.
整合素信号	CLDN10,CLU,COL12A1,COL3A1,FBLN1,FN1,ITGA8,PCDH7,RHOA,SPRY1.
生长因子和受体	EGR3,FGF1,FGFR3,IGF1R,NTRK3,TGFB3.
免疫和炎症反应	CFD,CXCL1,CXCL8 ,CYP8B1,IL17D,IL6,KNG1,NRG1,PCK1,PRLR,PTPRZ1.
mTOR信号	PIK3CA,PIK3R1.
原生纤毛	CYS1,DNAH5,GLI2,IFT88,LGALS3,PDGFRA,PKHD1,TMEM27,UMOD.
转录因子	FOSB,GLI2,JUN,WT1.
其他多囊肾病基因	AGXT2,ALDH8A1,CLCNKA,DPEP1,HGD,HRG,HSD11B2,MIOX,NAPSA,OSR2,PRKCB,RET,SCN5A,VGLL3.

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.