产品介绍：

先兆子痫是一种危及生命的疾病，在怀孕期间会出现高血压，胎盘的输送是唯一的治疗方法。如果怀孕少于32周，则认为该疾病为早发，否则称为迟发。先兆子痫的病因并不完全清楚。许多患者胎盘植入不良，提示先兆子痫在怀孕初期就开始了，尽管症状只是在以后才出现。潜在的分子机制涉及胎盘发育早期滋养细胞的血管重塑缺陷。随着疾病的进展，胎盘可能会变得缺氧，引起炎症和氧化应激。这些过程导致免疫细胞如T辅助细胞1（Th1）细胞，嗜中性粒细胞和自然杀伤细胞的浸润。类似的过程导致宫内发育迟缓或胎儿生长不足。先兆子痫研究的活跃领域包括努力确定怀孕期间患有先兆子痫高风险的妇女。

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Pre-Eclampsia PCR Array plate
种    属：	RAT
货    号：	WC-MRNA0128-R
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

RAT

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Abcc1

Bcl6

CLIC3

Cxcr4

F5

Hp

Il10

Itgb3

Ncam1

RGD1562284

Tac2

Vcan

B

Abcg2

Bhlhe40

Clu

CYP11A

Fabp4

Hsd17b1

Il11

Kit

Ndrg1

RT1-M3-1

Tbp

Vegfa

C

Adm

C3

Col14a1

Cyp26a1

FCGR1A

Hsp90aa1

Il18

Krt19

Nos3

SEMA4B

Tek

Inhba

D

Agtr1a

Cav1

Cp

Cyr61

Flt4

Htr3a

Il1a

Lep

Ntrk2

Serpina3n

Tgfb1

Mmp9

E

Angpt2

Ccl12

Crh

Dcn

Fstl3

Htra1

Il2

Lpl

NXPH1

Sod1

Timp1

Pgr

F

Apln

Cd40lg

Crhbp

Dusp1

Hbegf

Ifng

Il6

Mas1

Pdgfd

Spp1

Tnf

Tac1

G

Atp1b1

Cdh13

Cxcl10

EBI3

Hgf

Igf1

Inha

Mmp12

Pgf

Stat1

TPBG

Trem1

H

Atp2a2

Cfd

Cxcl9

Edn1

Hif1a

Igfbp3

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

基因分类（Rat）			相关基因
先兆子痫期间胎盘基因失调	早发性先兆子痫		Abcg2,Angpt2,Atp1b1,Bcl6,Bhlhe40,Cfd,Col14a1,Crh,Dcn,Dusp1,F5,Fabp4,Flt1,Fstl3,Hgf,Hsd17b1,Htra1,Igf1,Inha,Inhba,Lep,Lpl,Mmp12,Sod1,Spp1,Vcan.
	迟发性先兆子痫		Abcc1,Abcg2,Apln,Atp2a2,Bcl6,Bhlhe40,C3,Cav1,Cd40lg,Cdh13,Clu,Cp,Crh,Crhbp,Cxcl9,Cyp26a1,Dusp1,F5,Flt1,Fstl3,Hbegf,Hp,Hsd17b1,Hsp90aa1,Htr3a,Htra1,Ifng,Igfbp3,Il11,Il15,Il1a,Inha,Inhba,Itgb3,Kit,Krt19,Lep,Mas1,Ncam1,Ndrg1,Ntrk2,Pdgfd,Pgr,Qpct,Serpina3n,Sod1,Spp1,Stat1,Tac1,Tgfb1,Trem1.
妊娠	妊娠维持		Adm,Angpt2,Crh,Crhbp,Dcn,Flt1,Hif1a,Il11,Krt19,Lep,Pgf,Pgr,RT1-M3-1,Sod1,Tac3,Tgfb1.
	血管生成		Angpt2,C3,Ccl12,Cdh13,Cxcl10,Dcn,Flt1,Flt4,Hif1a,Il18,Il1a,Il6,Itgb3,Mmp9,Ndrg1,Nos3,Pgf,Tek,Vegfa.
	血管舒张		Adm,Agtr1a,Apln,Mas1,Nos3.
	组织重塑		Mmp12,Mmp9,Serpina3n,Timp1.
炎症反应			Agtr1a,Bcl6,C3,Ccl12,Cd40lg,Crh,Cxcl10 (Inp10),Cxcl9,Cxcr4,Fabp4,Il10,Il15,Il18,Il1a,Il2,Il6,Serpina3n,Spp1,Tac1,Tgfb1,Tnf.
氧化应激			Clu,Cyp26a1,Dusp1,Hif1a,Mmp9,Sod1.
细胞粘附分子			Cav1,Cd40lg,Cdh13,Col14a1,Fstl3,Itgb3,Ncam1,Spp1,Vcan.
细胞参与先兆子痫		Th1 细胞	Cd40lg,Ifng,Il18,Il2,Stat1,Tnf,Vegfa.
		内皮细胞	Angpt2,Cav1,Ccl12,Cd40lg,Cdh13,Edn1,Flt4,Hif1a,Itgb3,Nos3,Tek,Tgfb1,Vegfa.
		中性白细胞	Ccl12,Edn1,Ifng,Il6,Trem1.
		自然杀伤细胞	Il15,Il18,Il2.
止血和血红素代谢			Abcg2,Atp1b1,Atp2a2,C3,Cfd,Cyp26a1,F5,Hp,Inha,Inhba.
激素和生长因子			Adm,Apln,Crh,Crhbp,Edn1,Hbegf,Hgf,Igf1,Inha,Inhba,Lep,Pdgfd,Pgf,Qpct,Tac1,Tac3.
信号转导		一氧化氮信号	Cav1,Edn1,Hsp90aa1,Nos3.
		胰岛素信号	Htra1,Igf1,Igfbp3.

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.