使用 PCR ARRAY分析禽卵中复合有机卤素对细胞的影响
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作者:wcgene
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发布时间: 2020-03-13
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≈STR≈MUD> MAN。
2.双冠鸬鹚卵提取物对细胞活力和EROD活性的影响
双冠鸬鹚卵提取物在CEH中以浓度依赖性方式诱导EROD活性,随后在较高提取物稀释度下降低(图1)。我们实验室曾报道在较高施用浓度的AhR激动剂下EROD活性降低,与诱导物对反应的竞争性抑制有关。EROD EC 50值的提取物稀释 - 从MAN的0.172到HAM的0.003 - 表明这种敏感的生化分析可以从AhR活性的角度区分DCCO提取物(图1)。受污染最严重的3个地点 : MSI,MUD和HAM具有相似的EROD EC50值(0.003-0.007),而较少污染的地点(STR和MAN)具有较高的值(图1)。

图1.双冠鸬鹚卵提取物对鸡胚肝细胞中7-乙氧基脱嘌呤-O-脱乙酰酶(EROD)活性的浓度依赖性影响。
3禽类ToxChip PCR 芯片
图2显示非大湖地区(MAN)DCCO卵提取物对CEH的影响与其他四组大湖地区的DCCO卵提取物对CEH的影响有明显差异。各组样品中最显著的基因是Cyp1a4。cyp1a4的转录组学评价与erod分析的结果一致,后者测量cyp1a4酶的诱导,并被广泛用作野生动物暴露于与AHR结合的物质的生物标志物。cyp1a4 mRNA诱导的变异性也一致。说明可以使用高通量分析来评估二恶英类(DLC)污染物对不同地点的野生动物的潜在影响。
同样,CEH中的其他差异靶基因包括thrsp、txn、alas1、scd和lbfabp,也有助于研究污染物负担变化。
图2.热图显示鸡胚肝细胞(CEH)给药后由靶基因和双冠鸬鹚群聚类的第5代鸡毒性PCR芯片的基因显着倍数变化。红色和绿色分别表示上调和下调。
结果总结
从环境相关的生物基质(如野生动物组织)的提取物中快速制备复杂化学组分的方法可以确定实际的暴露场景,并通过体外分析确定影响。禽蛋是一种测定复杂混合物效应的有效的生物监测工具,结合快速提取方法、体外生物测定和靶向终点评价(如生化和转录组学)在环境效应监测有巨大前景。