产品介绍：

       在蛋白质合成所需的20种氨基酸中，其中6种（精氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、脯氨酸和色氨酸）统称为功能性氨基酸，调节与细胞生长和发育有关的关键代谢途径，以及免疫和生殖等其他重要生物过程。例如，亮氨酸激活mTOR信号并增加蛋白质合成，导致淋巴细胞增殖。因此，缺乏亮氨酸会损害免疫功能。与这些氨基酸的生物合成和降解相关的代谢途径包括维生素和辅助因子生物合成（如SAM或S-腺苷甲硫氨酸）以及神经递质代谢（如谷氨酸）。

沃吉基因氨基酸代谢I PCR阵列包括哺乳动物功能性氨基酸代谢的基因以及参与蛋氨酸代谢的基因，对营养感应和硫代谢也很重要。

       WCGENE®PCRArrayPlate操作简单。只需要将cDNA与qPCRmix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Amino Acid Metabolism I PCR Array plate
种    属：	Mouse
货    号：	WC-MRNA0006-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

mouse

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Aadat

Aanat

Abp1

Acadm

Acat1

Acmsd

Acy1

Adi1

Agmat

Ahcy

Aldh18a1

Aldh4a1

B

Aldh9a1

Amd1

Aoc1

Aox1

Apip

Arg2

Asl

Ass1

Auh

Baat

Bcat1

Bcat2

C

Bckdha

Bckdhb

Bckdk

Bhmt

C3

Cad

Cat

Cbs

Cdo1

Ckb

Cps1

Cth

D

Cyp1b1

Dao

Dbt

Ddc

Dld

Dnmt1

Ehhadh

Enoph1

Gamt

Gatm

Gcdh

Gfpt1

E

Gls

Glud1

Got2

Haao

Hmgcl

Hmgcs1

Ido1

Inmt

Ivd

Kmo

Kynu

Lap3

F

Lars

Ldha

Maob

Mat1a

Mccc2

Mpst

Mtap

Mtr

Nags

Nit2

Nos2

Oat

G

Odc1

Ogdhl

Otc

Oxct2a

P4ha1

Pdhb

Ppat

Prodh

Prodh2

Pycr1

Pycrl

Sat1

H

Sds

Srm

Tat

Tdo2

Tph2

Wars

Actb

Gapdh

Hprt1

B2m

NTC

NTC

基因分（Mouse）	相关基因
精氨酸代谢	Acy1,Agmat,Aldh18a1,Aldh4a1,Aldh9a1,Amd1,Aoc1,Arg2,Asl,Ass1,Ckb,Cps1,Gamt,Gatm,Glud1,Got2, Maob,Nags,Nos2,Oat,Otc,Sat1,Srm
半胱氨酸代谢	Cdo1,Cth,Ldha,Mpst,Sds
谷氨酰胺和谷氨酸/谷氨酸代谢	Aldh4a1,Asl,Ass1,Cad,Cps1,Gfpt1,Gls,Glud1,Got2,Nit2,Ppat
亮氨酸代谢	Acadm,Acat1,Aldh9a1,Aox1,Auh,Bcat2,Bckdha,Dbt,Dld,Ehhadh,Hmgcl,Hmgcs1,Ivd,Lars,Mccc2,Oxct2a,Pdhb
脯氨酸代谢	Dao,Lap3,Odc1,P4ha1,Prodh,Prodh2,Pycr1,Pycrl
色氨酸代谢	Aadat,Aanat,Acat1,Acmsd,Aldh9a1,Aoc1,Aox1,Cat,Cyp1b1,Ddc,Ehhadh,Gcdh,Haao,Ido1,Inmt,Kmo,Kynu,Maob,Ogdhl,Tdo2,Tph2,Wars
蛋氨酸代谢	Adi1,Ahcy,Amd1,Apip,Bhmt,Cbs,Dnmt1,Enoph1,Got2,Mat1a,Mtap,Mtr,Srm,Tat
辅因子代谢	Cth,Dbt,Dld,Haao,Hmgcl,Ido1,Kmo,Kynu,Mtr,Pdhb,Tdo2
硫代谢	Adi1,Bhmt,Cbs,Cdo1,Cth,Dld,Enoph1,Mtr
维生素代谢	Acadm,Aldh9a1,Haao,Ido1,Kmo,Kynu,Tdo2

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.