产品介绍：

细胞表面标志物PCR阵列分析了与细胞表面标记水平研究相关的90个基因的表达。这些标志物已用于研究，包括：1）确定癌组织中白细胞浸润的程度；2） 从患有慢性炎性疾病如动脉粥样硬化，哮喘，炎性肠病和关节炎的患者中分离的细胞群的表征；3） T细胞和B细胞谱系和克隆性的测定；4） 用于疾病分期和进展预后的白细胞群的表征；5）分析免疫浸润的组成及其与器官排斥的关系。

WCGENE®PCRArrayPlate操作简单。只需要将cDNA与qPCRmix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Cell Surface Markers PCR Array plate
种    属：	Rat
货    号：	WC-MRNA0028-R
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Rat

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Alcam

Cd2

CD34

Cd40 (Tnfrsf5)

Cd63

Cd80

Col1a2

Fcer1a

Itga2

Myh10

RT1-Da

Vcam1

B

C5ar1 (Gpr77)

Cd200r1

Cd36

Cd40lg (Tnfsf5)

Cd69

Cd83

Cr2

Fcer2

Itga3

Myh9

S100a8

Vwf

C

CD10

Cd22

Cd37

Cd44

Cd7

Cd86

Csf1r

Fcgr1a

Klrc1

Myocd

Selp

Fas (Tnfrsf6)

D

CD123

Cd24

Cd38

CD45RA

Cd70 (Tnfsf7)

Cd8a

Ctla4

Icam2

Klrd1

Ncam1

St6gal1

Itga1

E

CD127

Cd244

Cd3d

CD45RB

Cd72

Cd8b

Dpp4

Il12rb1

Krt18

Nos3

Tek (Tie-2)

Ms4a1

F

Cd163

Cd247 (Cd3z)

Cd3e

Cd48

Cd74

Cd96

Eng (Evi-1)

Il1r2

Krt5

Nt5e

Tnfrsf4

Retn

G

Cd19

Cd28

Cd3g

Cd5

Cd79A

Chst10

Epcam

Il2ra

Krt8

Pecam1

Tnfrsf8

Tpsab1

H

Cd1d1

Cd34

Cd4

Cd6

Cd79B

Col1a1

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

基因分类（rat）	相关基因
B细胞表面标记	活化的B细胞Cd28,Cd38,Cd69,Cd70 ,Cd80,Cd83,Cd86,Dpp4,Fcer2,Il2ra ,Tnfrsf8.成熟的BCd19,Cd22,Cd24,Cd37,Cd40,Cd72,Cd74,Cd79al,Cd79b,Cr2,Il1r2,Itga2,Itga3,Ms4a1,St6gal1.其他B细胞表面标记Cd200r1,Chst10,Nt5e,RT1-Da.
T细胞表面标记	细胞毒性T细胞Cd8a,Cd8b,Ctla4.辅助性T细胞Cd4.活化的TAlcam,Cd2,Cd38,Cd40lg,Cd48,Cd69,Cd70 ,Cd83,Cd96,Ctla4,Dpp4,Il12rb1,Il2ra,Itga1,RT1-Da,Tnfrsf4 ,Tnfrsf8.其他T细胞表面标记Cd247,Cd28,Cd37,Cd3d,Cd3e,Cd3g,Cd5,Cd6,Cd7,Fas,Klrd1,Nt5e,St6gal1.
自然杀伤（NK）细胞表面标记	Cd2,Cd244,Cd247,Cd7,Cd96,Chst10,Il12rb1,Klrc1,Klrd1,Ncam1.
单核细胞和巨噬细胞表面标志物	活化的巨噬细胞Cd69,Eng ,Fcer2,Il2ra其他单核细胞和巨噬细胞表面标C5ar1,Cd163,Cd34,Cd36 ,Cd40,Cd44,Cd63,Cd70 ,Cd74,Cd86,Chst10,Csf1r,Dpp4,Fcgr1a,Icam2,Il1r2,Itga1,Itga2,RT1-Da,S100a8,Tnfrsf8.
内皮细胞表面标记	Eng ,Icam2,Nos3,Pecam1,Selp,Tek ,Vcam1,Vwf.
平滑肌细胞表面标记	Myh10,Myh9l1,Myocd.
树突状细胞表面标记	Cd40,Cd83,Cd86,Cr2,Fcer2.
肥大细胞表面标记	C5ar1,Fcer1a,Fcer2,Tpsab1.
成纤维细胞（基质细胞）表面标记	Alcam,Col1a1,Col1a2.
上皮细胞表面标记	Cd1d1,Epcam,Krt18,Krt5,Krt8.
脂肪细胞表面标记	Retn.

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.