产品介绍：

在每个人类的月经周期中，子宫内膜层为怀孕做准备，同时一个卵巢释放成熟的卵母细胞。如果卵母细胞受精，它将在穿过输卵管进入子宫时开始分裂。子宫内膜必须经历显著的基因表达变化，这是胚胎植入成功所必需的。这些变化涉及白细胞介素-1、WNT和前列腺素等信号通路，以及细胞凋亡、细胞周期调节和白细胞迁移到接受性子宫内膜等生物学过程。每个月经周期，子宫内膜只能接受胚胎3-5天，称为着床窗口。尽管现在有许多辅助生殖技术可以实现一个可行的怀孕。虽然这些技术，如体外受精（IVF），可以识别出最有前途的胚胎，但超过一半的IVF胚胎无法植入。一个较短或不存在的植入窗口可以解释一些不孕妇女的这种现象。已经发表了许多微阵列研究，以确定植入窗口期子宫内膜基因表达的变化，以及可生育和不孕妇女的比较。仍需进行其他研究，以确定潜在的这一复杂过程的分子机制，可能通过监测该阵列中关键基因的表达来确定。

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

 

产品内容

品    名：	Female Infertility PCR Array plate
种    属：	Human
货    号：	WC-MRNA0054-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

 

Human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

AKT1

C3

CLDN4

CYP19

FN1

HOXA11

IL1R1

LEP

MMP9

PRL

STAT3

VEGFA

B

ANXA2

CALCA

COMP

DKK1

FSHR

ICAM1

IL6

LIF

MSX1

PTGS1

STMN1

WNT2

C

APOD

CASP3

CRABP2

EGF

GADD45A

IGF1

INHC

LIFR

MUC1

PTGS2

TGFB1

LAMC2

D

AR

CCL5

CSF1

EGFR

GAST

IGFBP1

ITGA4

MAOA

OLFM1

SELL

TIMP1

MMP7

E

AREG

CCNB1

CTNNB1

ESR1

GDF15

IL11

ITGAV

MID1

PAEP

SFRP4

TNF

PGR

F

BAX

CD55

CXCL12

ESR2

GPX3

IL15

ITGB3

MKI67

PCNA

SHBG

TNFRSF10B

SPP1

G

BCL2

CDH1

CYP11

F3

HBEGF

IL1A

KDR

MMP2

PGF

SOD1

TP53

VCAM1

H

C2

CFD

CYP17

FBN1

HOXA10

IL1B

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

基因分类（Human）		相关基因
不孕症期间失调		CFD,CLDN4,COMP,CRABP2,DKK1,ESR2,GADD45A,GAST,GDF15,GPX3,IGFBP1,IL15,MAOA,MSX1,OLFM1,PAEP,SFRP4,SPP1
接受性子宫内膜		AREG,CALCA,CSF1,EGF,HOXA10,HOXA11,LEP,LIF,LIFR,MUC1,PAEP,PGR,PTGS1,PTGS2,SELL.
信号转导	白细胞介素-1信号	IL1A,IL1B,IL1R1
	WNT信号	CDH1,CTNNB1,DKK1,MMP7,PTGS2,SFRP4,TP53,WNT2
	前列腺素信号	PTGS1,PTGS2.
	其他信号转导基因	AKT1,EGF,EGFR,GDF15,STAT3,TGFB1
白细胞迁移		CALCA,CCL5,CLDN4,CTNNB1,CXCL12,FBN1,FN1,ICAM1,ITGA4,ITGAV,ITGB3,LAMC2,MMP2,MMP7,MMP9,SELL,SPP1,VCAM1.
细胞周期		CCNB1,GADD45A,MKI67,PCNA,STMN1,TGFB1,TP53
凝聚作用		C2,C3,CD55,CFD,F3.
细胞凋亡		BAX,BCL2,CASP3,COMP,GADD45A,IL1B,MSX1,TNF,TNFRSF10B,TP53.
细胞因子		CCL5,CSF1,CXCL12,IL11,IL15,IL1A,IL1B,IL1R1,IL6,LIFR,TGFB1.
其他与怀孕有关的基因		ANXA2,APOD,AR,ESR1,HBEGF,IGF1,KDR,MID1,PGF,PRL,SOD1,TIMP1,VEGFA.

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.