产品介绍：

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Hematopoiesis PCR Array plate
种    属：	Mouse
货    号：	WC-MRNA0073-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

mouse

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Abca15

Acvr1b

Acvr2a

Adam17

Adam8

Adar

Ahsp

Angpt1

Apc

Ash2l

Blnk

Cbfb

B

Ccr1

Cd14

Cd164

Cd1d1

Cd2

Cd27

Cd34

Cd3d

Cd3g

Cd4

Cd44

Cd80

C

Cd86

Cd8a

Cebpe

Cebpg

Csf1

Csf2

Dll1

Ets1

Etv6

Flt3l

Fut10

Fzd1

D

Gata1

Gata2

Hdac4

Hdac5

Hdac7

Hdac9

Il10

Il11

Il12b

Il1a

Il2

Il20

E

Il25

Il31ra

Il6st

Inha

Inhba

Jag1

Jag2

Kdr

Kit

Kitl

Lef1

Lmo2

F

Lrmp

Mal

Map4k1

Mmp9

Ncoa6

Nos2

Notch1

Notch2

Notch4

Pax5

Pecam1

Pf4

G

Ptprc

Rbpj

Runx1

Sfxn1

Socs5

Spp1

Stat1

Stat3

Stim2

Tal1

Tek

Tlr3

H

Tlr4

Tnfsf11

Trim10

Vav1

Vegfa

Wnt3a

Actb

Gapdh

Hprt

B2m

NTC

NTC

基因分(Mouse）	相关基因
细胞表面和细胞谱系标记	Ccr1,Cd164,Cd1d1,Cd2,Cd27,Cd34,Cd3d,Cd3g,Cd4,Cd44,Cd80,Cd86,Cd8a,Csf1,Dll1,Flt3l,Fut10,Fzd1,Il31ra,Il6st, Jag1,Jag2,Kdr,Kit,Kitl,Lrmp,Mal,Notch2,Notch4,Pecam1,Ptprc,Sfxn1,Stim2,Tek ,Tlr3,Tlr4,Tnfsf11
细胞因子	Csf1,Csf2,Flt3l,Il10,Il11,Il12b,Il1a,Il2,Il20,Il25,Inha,Inhba,Pf4,Spp1,Tnfsf11
生长因子	Csf1,Csf2,Il10,Il11,Il1a,Il2,Inha,Inhba,Jag1,Jag2,Kitl,Spp1,Vegfa
细胞周期停滞	Inha,Inhba,Notch2
细胞周期的其他调节因子	Apc,Hdac4,Hdac5,Hdac7,Hdac9,Il1a,Jag2,Stat1,Vegfa
B细胞活化	Hdac4,Hdac5,Hdac7,Hdac9.
T细胞活化	Cd2,Cd3d,Cd3g,Cd80,Cd86,Cd8a
激活其他血细胞	Cd2,Il11,Il12b,Il2,Il31ra,Pf4,Tlr4
B-细胞分化	Blnk,Cd27,Hdac4,Hdac5,Hdac7,Hdac9,Il10,Il11,Inha,Inhba
T-细胞分化	Cd2,Cd27,Cd4,Cd80,Cd86,Il12b,Il2,Jag2,Nos2,Socs5
其他血细胞类型的分化	Ahsp,Angpt1,Cd3g,Csf1,Dll1,Il11,Il20,Il31ra,Inha,Inhba,Jag1,Mal,Map4k1,Ncoa6,Notch1,Notch2,Notch4,Pax5,Pf4,Spp1,Tal1, Tlr3,Tlr4,Tnfsf11
造血调节剂	Ahsp,Ash2l,Cd164,Csf1,Dll1,Fut10,Il10,Il20,Il31ra,Jag1,Lmo2,Mmp9,Notch2,Notch4,Stim2,Trim10.
Notch信号	Dll1,Jag1,Jag2,Notch2,Notch4
WNT 信号	Apc,Fzd1,Lef1,Wnt3a
JAK / STAT信号	Il31ra,Socs5,Stat1,Stat3
细胞表面受体	Ccr1,Cd14,Cd2,Cd27,Cd3d,Cd3g,Cd4,Csf2,Fzd1,Il6st,Inha,Inhba,Ptprc
转录因子和调节因子	Ash2l,Cbfb,Cd80,Cd86,Cebpe,Cebpg,Ets1,Etv6,Gata1,Gata2,Hdac4,Hdac5,Hdac7,Hdac9,Il31ra,Lef1,Ncoa6,Notch1, Notch2,Notch4,Pax5,Rbpj,Runx1,Stat1,Stat3,Tal1,Vav1

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.