产品介绍

描述

      人类高血压RT²Profiler PCR阵列分析84个关键基因的表达来自调节血管收缩和扩张的生物途径各种信号。原发性高血压或慢性高动脉血压，仍然是多种心血管疾病和其他疾病的主要风险因素之一对许多器官的病理影响。继发性高血压也由糖尿病引起以及过度活跃的交感神经系统带来的压力。正常情况下，肾素-血管紧张素该系统通过肝脏和肾脏向血管发出激素信号来调节血压。血管内皮细胞通过释放一氧化氮对激素和神经冲动作出反应氧化物对周围的平滑肌造成收缩。内皮的功能障碍，由于这些途径中的任何一种的失调，导致引起高血压的血管收缩和血管舒张。靶器官和组织可以用这个阵列分析的高血压包括心脏、肾脏、肝脏、肺部和甚至包括毛细血管和平滑肌的活组织检查。的完整表达式配置文件这些基因应该是解开分子机制的有效工具控制高血压的发作和进展以及由此产生的心血管疾病疾病。使用实时PCR，您可以轻松可靠地分析用这个阵列对参与高血压的基因进行聚焦。

      WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Hypertension PCR Array plate
种    属：	Human
货    号：	WC-MRNA0265-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ACE

AGTR1

AVPR1B

CHRNB1

CNGB1

DRD3

Fgfr2

KCNJ8

NOSTRIN

PDE5A

REN

UTS2

B

ACE2

AGTR2

BDKRB1

CLIC1

CNGB3

DRD5

GCH1

KCNMA1

NPPB

PLCG1

S1PR1

UTS2R

C

ACTA2

ALOX5

BDKRB2

CLIC4

CPS1

ECE1

GCHFR

KNG1

NPPC

PLCG2

SCNN1A

ITPR2

D

ADM

ARG2

BMPR2

CLIC5

Cyp3a11

EDN1

GUCY1A3

MYLK

NPR1

PRKG1

SCNN1B

NOSIP

E

ADRA1B

ATP2C1

CACNA1C

CNGA1

Cyp3a16

EDN2

GUCY1B3

MYLK2

NPY1R

PRKG2

SCNN1G

PDE3B

F

ADRA1D

ATP6AP2

CALCA

CNGA2

Cyp3a41a

EDNRA

HIF1A

MYLK3

P2RX4

PTGIR

SLC7A1

PTGS2

G

ADRB1

AVP

CAV1

CNGA3

Cyp3a41b

EDNRB

ITPR1

NOS3

PDE3A

PTGS1

SPHK1

SPHK2

H

AGT

AVPR1A

CHRNA1

CNGA4

Cyp3a44

EPHX2

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

基因分类（human）	相关基因
Vasodilation	ACE,ACE2,ADM,ADRB1,AGTR1,AGTR2,CALCA,CPS1,EDNRB,EPHX2,GCH1,KCNJ8,KNG1,NOS3 (eNOS),NPPB, NPPC,NPR1,P2RX4,PDE5A.
Vasoconstriction	ACE,ACE2,ADM,ADRA1B,AGT,AGTR1,ALOX5,AVP,AVPR1A,BDKRB2,BMPR2,CACNA1C,CAV1,ECE1,EDN1,EDN2, EDNRA,EDNRB,NPPC,NPY1R,PTGS1 (COX1),PTGS2 (COX2),UTS2R.
Vasotone	AGTR1,DRD3,NOS3 (eNOS),NPPB,NPPC,REN.
Smooth MuscleContraction	ACTA2 (αSMA),ADRA1B,ADRB1,BDKRB2,CACNA1C,CAV1,EDN1,EDN2,EDNRA,EDNRB,KCNMA1,KNG1,P2RX4,PTGS1 (COX1),PTGS2 (COX2),UTS2.
Smooth Muscle Relaxation	GUCY1A1,KCNMA1,P2RX4.
Myosin Light ChainKinases	MYLK,MYLK2,MYLK3.
Blood Pressure Regulation	ACE,ACE2,ACTA2 (α-SMA),AGT,AGTR2,AVP,AVPR1A,AVPR1B,BDKRB2,CACNA1C,CALCA,DRD3,DRD5,ECE1,EDN1,EDN2,EDNRB,EPHX2,GCH1,GUCY1A1NOS3 (eNOS),NPPB,NPPC,NPR1,NPY1R,P2RX4,PTGS1 (COX1),PTGS2 (COX2),REN,UTS2,UTS2R.
Renin-Angiotensin System	ACE,ACE2,AGT,AGTR1,ECE1,REN.
Nitric Oxide Signaling	AGT,AGTR2,GUCY1A1,GUCY1B1,NOSIP,NOSTRIN.
NitricOxideMetabolism	AGTR2,ARG2,CAV1,CPS1,EDN1,GCH1,GCHFR,HIF1A,NOS3 (eNOS),P2RX4
CyclicGMPSynthesis&Signaling	ADRA1D,GUCY1B1,PDE3B,PRKG1,PRKG2,PTGIR,S1PR1.
Osmotic Stress	AGT,AVP,AVPR1B,BDKRB2,KCNMA1.
HypoxiaSignaling	ACE,ADM,CAV1,ECE1,EDN1,EDNRA,HIF1A,KCNMA1,NOS3 (eNOS),NPPC,PDE5A
SecondaryMessenger- MediatedSignaling	ADRA1D,PDE3B,PTGIR,S1PR1,SPHK1.
Ion Transport	ATP2C1,ATP6AP2,BDKRB1,CHRNA1,CHRNB1,CLIC1,CLIC4,CLIC5,CNGA1,CNGA2,CNGA3,CNGA4,CNGB1,CNGB3,ITPR1,ITPR2,PLCG2,SCNN1A,SCNN1B,SCNN1G,SLC7A1
Lipid Metabolism	PDE3A,PDE3B,PLCG1,PLCG2,SPHK1,SPHK2.

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.