产品介绍：

       急性炎症因感染或损伤引起的细胞损伤而发生。在此过程中，细胞和血浆衍生因子鼓励外渗，招募循环免疫细胞进入受影响的组织。这些免疫细胞反过来调节炎性细胞因子的表达，其招募额外的免疫细胞以安装对任何入侵生物体的免疫反应，并进一步促进和最终解决炎症反应。慢性炎症或这些细胞因子的表达受体在长时间内处于低水平，促进各种病理变化包括过敏，哮喘，心血管系统疾病在内的疾病动脉粥样硬化），中枢神经系统疾病（阿尔茨海默病），纤维化和类风湿性关节炎。

沃吉基因炎性细胞因子和受体PCR阵列包含介导免疫级联反应的基因，参与细胞凋亡的趋化因子，细胞因子和白细胞介素炎症反应与其受体一样具有代表性。分析这些炎性细胞因子和受体基因的表达有助于确定炎症的状态实验模型系统中炎症背后的机制

      WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验，引物验证，文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Inflammatory Cytokines & Receptors PCR Array plate
种    属：	Human
货    号：	WC-MRNA0266-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

AIMP1

CCL17

CCL4

CCR5

CSF3

CXCL2

CXCR4

IL15

IL1R2

IL7

OSM

TNFSF4

B

BMP2

CCL2

CCL5

CCR6

CX3CL1

CXCL3

CXCR5

IL16

IL1RN

IL8

SPP1

VEGFA

C

C5

CCL20

CCL7

CCR7

CX3CR1

CXCL5

FASLG

IL17A

IL21

IL9

TNF

IL13

D

CCL1

CCL22

CCL8

CCR8

CXCL1

CXCL6

IFNA2

IL17C

IL27

IL9R

TNFRSF11B

IL1R1

E

CCL11

CCL23

CCR1

CCR9

CXCL10

CXCL9

IFNG

IL17F

IL3

LTA

TNFSF10

IL5RA

F

CCL13

CCL24

CCR2

CD40LG

CXCL11

CXCR1

IL10RA

IL1A

IL33

LTB

TNFSF11

NAMPT

G

CCL15

CCL26

CCR3

CSF1

CXCL12

CXCR2

IL10RB

IL1B

IL5

MIF

TNFSF13

TNFSF13B

H

CCL16

CCL3

CCR4

CSF2

CXCL13

CXCR3

ACTB

GAPDH

HPRT1

18S

NTC

NTC

基因分类（Human）	相关基因
趋化因子	C5，CCL1，CCL11，CCL13，CCL15，CCL16，CCL17，CCL2，CCL20，CCL22，CCL23，CCL24，CCL26，CCL3，CCL4，CCL5，CCL7，CCL8 ，CX3CL1，CXCL1，CXCL10，CXCL11，CXCL12，CXCL13，CXCL2，CXCL3，，CXCL5，CXCL6，CXCL9
趋化因子受体	CCL13，CCR1，CCR2，CCR3，CCR4，CCR5，CCR6，CCR8，CX3CR1，CXCR1，CXCR2
白细胞间介素	CXCL8，IL13，IL15，IL16，IL17A，IL17C，IL17F，IL1A，IL1B，IL1RN，IL21，IL27，IL3，IL33，IL5，IL7，IL9
白细胞介素受体	IL10RA，IL10RB，IL1R1，IL5RA，IL9R
其他细胞因子	AIMP1，BMP2，CD40LG，CSF1，CSF2，CSF3，FASLG，IFNA2，IFNG，LTA，LTB，MIF，NAMPT，OSM，SPP1，TNF，TNFSF10，TNFSF11，TNFSF13，TNFSF13B，TNFSF4，VEGFA
其他细胞因子受体	TNFRSF11B

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.