产品介绍：

       干扰素基因刺激物 (STING) 是一种衔接蛋白，它在响应胞质核酸配体的 I 型干扰素激活中起重要作用，STING信号通路因其独特的激活机制以及对癌症、衰老和自身免疫的产生广泛影响，是一种重要的先天免疫信号级联反应，负责感知异常的胞质双链 DNA (dsDNA)，这是癌症和病毒感染的标志。错误的 STING 激活会加剧许多自身免疫和炎症综合征。此外，在维持免疫稳态的同时，能够快速、有效且具体地对无数威胁做出反应。

       沃吉基因STING信号PCR阵列包含激活STING基因及其下游基因，调控下游通路基因，如自噬，JAK-STAT信号通路等关键的90个基因。

       WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	STING Signaling PCR Array plate
种    属：	Mouse
货    号：	WC-MRNA0221-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Mouse

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Aim2

Ciita

Dhx36

Ifna1

Ikbkb

Irf3

Mre11a

Polr1a

Ripk3

Stat3

Trex1

Xrcc6

B

Akt1

Creb1

Dhx9

Ifna2

Ikbke

Irf7

Myd88

Polr2a

Rnf5

Stat6

Trim21

Zbp1

C

Amfr

Crebbp

Dtx4

Ifnar1

Ikbkg

Irf9

Nfkb2

Ppm1a

Rps27a

Sting1

Trim32

Nlrc3

D

Atg5

Ctla4

Ep300

Ifnar2

Il18

Irs1

Nfkbia

Prkdc

Socs1

Tbk1

Trim56

Ripk1

E

Ccl5

Cxcl10

Gsk3a

Ifnb1

Il1a

Irs2

Nfkbib

Ptpn22

Socs2

Tlr3

Tyk2

Stat2

F

Cd274

Cxcl11

Gsk3b

Ifng

Il1b

Jak1

Nkiras1

Rela

Socs3

Tlr7

Uba52

Tnf

G

Cgas

Cxcl9

Hdac3

Ifngr1

Insig1

Jak2

Nkiras2

Relb

Stat1

Tlr9

Ulk1

Xrcc5

H

Chuk

Ddx41

Ifi16

Ifngr2

Irf1

Lrrfip1

Actb

Gapdh

Hprt1

B2m

NTC

NTC

基因分类（mouse）	相关基因
信号转导分子	TBK1,STING1.
转录因子	IRF3,STAT6,RELA.
信号通路调节分子	INSIG1,AMFR,TRIM21,TREX1,PPM1A,RNF5,ULk1,
干扰素	IFNA1;IFNA2;IFNAR1;IFNAR2;IFNB1;IFNG;IFI16;IFNGR1;IFNGR2;IRF1;IRF3;IRF7;IRF9.
胞浆感受器	ZBP1,IFI16,DDX41,CGAS.
JAK-STAT signaling	AKT1;CXCL9;JAK1;JAK2;STAT1;STAT2;STAT3;SOCS1;SOCS2;SOCS3;TYK2.
TLR受体	TLR3,TLR7,TLR9.
sting激活下游基因	TRIM32,TRIM56,IKBKG,IKBKB,IKBKE,NFKBIA,NFKBIB,NKIRAS1,NKIRAS2.
炎性细胞因子	AIM2,CCL5,CIITA,CHUK,MYD88,NLRC3,TNF.
其他相关基因	CREB1,CD274,CREBBP,CXCL10,DHX36,DTX4,DHX9,EP300,GSK3A,GSK3B,HDAC3,IRS1,IRS2,LRRFIP1, MRE11,NKIRAS1,NKIRAS2,PRKDC,PTPN22,RIPK1,RIPK3,RPS27A,POLR1A,POLR2A,XRCC5,XRCC6,UBA52,

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.