产品介绍：

沃吉基因T细胞和B细胞活化PCR阵列涉及B细胞活化的基因以及B细胞增殖和分化的基因。还涉及参与T细胞活化及其增殖和分化的基因以及调节Th1和Th2发育和T细胞极化的基因。还包括参与巨噬细胞，嗜中性粒细胞和自然杀伤细胞活化的基因。

 WCGENE®PCRArrayPlate操作简单。只需要将cDNA与qPCRmix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	T-Cell & B-Cell Activation PCR Array plate
种    属：	HUMAN
货    号：	WC-MRNA0138-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ADA

AICDA

APC

BCL2

BLM

BLNK

CCL3

CCR1

CCR2

CCR3

CCR4

CCR5

B

CD1D

CD2

CD226

CD27

CD274

CD276

CD28

CD3D

CD3E

CD3G

CD4

CD40

C

CD40LG

CD47

CD5

CD7

CD80

CD81

CD84

CD86

CD8A

CD8B

CSF2

CX3CL1

D

CXCR3

CXCR4

CXCR5

DPP4

EGR1

FAS

FASLG

FOXP3

ICOSLG

IFNG

IL10

IL11

E

IL12A

IL12B

IL12RB1

IL12RB2

IL13

IL15

IL18

IL18R1

IL1B

IL2

IL21

IL21R

F

IL2RA

IL3

IL4

IL4R

IL5

IL6

IL6R

IL7

IL8

IRF4

LAG3

LCK

G

MAP3K7

MICB

MS4A1

NCK1

NOS2

PTPRC

RAG1

RIPK2

SOCS1

TBP

TGFB1

TLR1

H

TLR2

TLR4

TLR6

TLR9

TNFSF14

VAV1

ACTB

GAPDH

HPRT1

18S

NTC

NTC

基因分类（Human）		相关基因
T细胞活化	T细胞活化调节剂	CD2,CD276,CD3D,CD3E,CD3G,CD4,CD47,CD7,CD80,CD86,CD8A,CD8B,DPP4,FOXP3,ICOSLG,IRF4, LAG3,LCK,MAP3K7,MICB,NCK1,TNFSF14,VAV1
	T细胞增殖	CD28,CD3E,ICOSLG,IL10,IL12B,IL18,IL1B,NCK1,RIPK2,TNFSF14
	T细胞分化	ADA,APC,BCL2,BLM,CD1D,CD2,CD27,CD4,CD80,CD86,EGR1,IL12B,IL15,IL2,IRF4,NOS2,PTPRC,SOCS1.
	T细胞极化	CCL3,CCR1,CCR2,CCR3,CCR4,CCR5,CD274 (PD-L1),CD28,CD4,CD40LG,CSF2,CXCR3,CXCR4,IFNG,IL12A,IL12RB1,IL12RB2,IL18R1,IL2,IL4,IL4R ,IL5,TGFB1.
	Th1和Th2发育调节剂	CD2,CD40,CD5,CD7,CSF2,IFNG,IL10,IL12A,IL13,IL3,IL4,IL5,TLR2,TLR4,TLR9
	Th1和Th2分化	CD28,CD40,CD40LG,CD86,IFNG,IL12A,IL12B,IL12RB1,IL12RB2,IL18,IL18R1,IL2,IL2RA,IL4,IL4R,IL6
B细胞活化	抗原依赖性B细胞活化	CD28,CD4,CD40 ,CD40LG,CD80,FAS,FASLG ,IL10,IL2,IL4
	其他B细胞活化基因	ADA,CXCR5,ICOSLG,IL6,IL7,MS4A1,TGFB1
	B细胞增殖	BCL2,CD27,CD40,CD81,IL10,IL7,PTPRC
	B细胞分化	ADA,AICDA,BLNK,CD27,IL10,IL11,IL4,RAG1
激活其他免疫细胞	巨噬细胞活化	IL13,IL4,TLR1,TLR4,TLR6.
	中性粒细胞激活	IL8
	自然杀伤细胞激活	CD2,IL12A,IL12B,IL2
	白细胞活化	CX3CL1

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.