产品介绍：

      复杂而耗时的成功地将胚胎干细胞(ESCs)或诱导多能干细胞(iPSCs)分化为特定的细胞类型的过程是复杂而耗时的。诱导多能干细胞(iPSCs)分化成特定的细胞类型，需要在进行实验之前通过测试 在进行实验之前，需要通过测试阳性细胞标志物来验证。然而，进一步 对其他细胞类型标记的检查是同样重要的阴性对照 确认分化程序的特异性。例如，将iPSCs分化为 分化成动脉内皮细胞的iPSCs应该表达动脉标志物，而不表达静脉标志物。例如。诱导多能干细胞(iPSCs)分化成特定的细胞类型，需要在进行实验之前通过测试 在进行实验之前，需要通过测试阳性细胞标志物来验证。然而，进一步 对其他细胞类型标记的检查是同样重要的阴性对照 确认分化程序的特异性。例如，将iPSCs分化为 分化成动脉内皮细胞的iPSCs应该表达动脉标志物，而不表达静脉标志物。或者。心肌细胞标志物的表达证实了成功分化为该细胞的 类型，而其他主要器官（如肺、胰腺和大脑）的细胞则没有标记。胰腺和大脑）的标志物，确保没有其他不相关的细胞类型。这个阵列提供了 为分化后的细胞识别提供了完整的答案。它包括一到三个 来自13个主要器官或细胞类型的特定基因表达标记，以及多达7个更具体类型的亚群。

      WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Terminal Differentiation Markers PCR Array plate
种    属：	MOUSE
货    号：	WC-MRNA0141-M
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

  基因列表

MOUSE

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

Acan

Alb

Cd79a

Cxcr4

Galc

Itgb4

Mafb

Myod1

Pecam1

Rlbp1

Smtn

Tyrp1

B

A2M

Aqp1

Cdh5

Cyp27b1

Gcg

Kdr

Mbp

Nefh

Pmel

Sftpb

Sst

Umod

C

Abca15

Aqp2

Chat

Dll4

Gfap

Krt1

Miox

Nphs2

Pou3f4

Sftpc

Tagln

Myh7

D

Abca5

Bglap2

Col10a1

Efnb2

Ghrl

Krt10

Mtap2

Nppa

Pou4f2

Sftpd

Tat

Pde6b

E

Abhd5

Calcr

Col2a1

Emr1

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Krt14

Myh1

Nr2f2

Pparg

Slc17a6

Tbp

Rcvrn

F

Abl1

Cav3

Comp

Fabp4

Ins2

Krt19

Myh11

Nrp1

Ppy

Slc17a7

Th

Slc32a1

G

Acer1

Ccr5

Cpa1

G6pc

Isl1

Lyve1

Myh6

Nrp2

Prox1

Slc2a2

Tubb3

Tyr

H

Adipoq

Cd3e

Ctsk

Gad1

Itgam

Mafa

ACTB

GAPDH

HPRT1

18s

NTC

NTC

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.