产品介绍：

蛋白酪氨酸激酶超家族包括约60种受体酪氨酸激酶（RTK）和约30种细胞内酪氨酸激酶。RTK包括细胞外结构域，跨膜结构域和催化细胞内结构域。激活后，RTK二聚化并自磷酸化其细胞内结构域，启动通常包括非受体酪氨酸激酶的下游信号传导。非受体酪氨酸激酶包括催化结构域和调节结构域，其针对每个家族而变化。例如，SRC家族激酶调节结构域需要自磷酸化来激活激酶结构域，而大多数其他细胞内酪氨酸激酶家族使用不同的调节机制。酪氨酸激酶参与许多基本的生物学过程，例如生长，增殖和分化。这些过程通常在肿瘤发生过程中失调，通常是由于关键酪氨酸激酶或调节剂的突变。这些致癌过程使酪氨酸激酶超家族成员成为有吸引力的药物靶标，并且市场上已有几种靶向酪氨酸激酶的化学治疗剂（例如甲磺酸伊马替尼）。

沃吉基因酪氨酸激酶PCR阵列包括大多数RTK和非受体酪氨酸激酶关键90个基因。

WCGENE® PCR Array Plate操作简单。只需要将cDNA与qPCR mix混匀，然后加入每个孔里，上机检测，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

产品内容

品    名：	Tyrosine Kinases PCR Array plate
种    属：	HUMAN
货    号：	WC-MRNA0154-H
规    格：	96孔板
品    牌：	Wcgene® biotech
产    品：	96孔引物预置板，封板膜，说明书
储    存：	-20℃
有效期：	六个月
生产日期：	见外包装
使用限制：	本产品仅供科研使用，不应用于诊断、预防和治疗疾病。

基因列表

Human

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

A

ABL1

ABL2

ADH1B

ALDH1B1

ALDH3A1

ALK

AXL

BLK

BTK

CSF1R

CSK

DDR1

B

DDR2

EGFR

EPHA1

EPHA2

EPHA3

EPHA4

EPHA5

EPHA7

EPHA8

EPHB1

EPHB2

EPHB3

C

EPHB4

EPHB6

ERBB2

ERBB3

ERBB4

FER

FES

FGFR1

FGFR2

FGFR3

FGFR4

FGR

D

FLT1

FLT3

FLT4

FRK

FYN

HCK

IGF1R

IGF2R

INSR

INSRR

ITK

JAK1

E

JAK2

JAK3

KDR

KIT

LCK

LTK

LYN

MAOA

MAOB

MATK

MERTK

MET

F

MST1R

MUSK

NTRK1

NTRK2

NTRK3

PDGFRA

PDGFRB

PTK2

PTK2B

PTK6

PTK7

RET

G

ROR1

ROR2

ROS1

RYK

SRC

SRMS

SYK

TBP

TEC

TEK

TIE1

TNK1

H

TNK2

TXK

TYK2

TYRO3

YES1

ZAP70

ACTB

GAPDH

HPRT1

18S

NTC

NTC

基因分类（Human）		相关基因
受体酪氨酸激酶	ALK家族成员	ALK,LTK
	AXL家庭成员	AXL,MERTK,TYRO3
	死亡域受体	DDR1,DDR2
	EGFR家族成员	EGFR,ERBB2,ERBB3,ERBB4.
	EPH家族成员	EPHA1,EPHA2,EPHA3,EPHA4,EPHA5,EPHA7,EPHA8,EPHB1,EPHB2,EPHB3,EPHB4,EPHB6
	FGFR家族成员	FGFR1,FGFR2,FGFR3,FGFR4.
	INSR家族成员	IGF1R,IGF2R,INSR,INSRR.
	MET家族成员	MET,MST1R
	PDGFR 家族成员	CSF1R,FLT3,KIT,PDGFRA,PDGFRB
	ROR 家族成员	ROR1,ROR2
	TIE 家族成员	TEK ,TIE1
	TRK 家族成员	NTRK1,NTRK2,NTRK3.
	VEGF 家族成员	FLT1 ,FLT4,KDR
	其他受体酪氨酸激酶	MUSK,PTK7,RET,ROS1,RYK
非-受体酪氨酸激酶	ABL 家族成员	ABL1,ABL2
	ACK 家族成员	TNK1,TNK2
	CSK 家族成员	CSK,MATK
	FAK 家族成员	PTK2 ,PTK2B
	FES 家族成员	FER,FES
	FRK 家族成员	FRK,PTK6 ,SRMS.
	JAK 家族成员	JAK1,JAK2,JAK3,TYK2
	SRC-A 家族成员	FGR,FYN,SRC,YES1
	SRC-B 家族成员	BLK,HCK,LCK,LYN
	TEC 家族成员	BTK,ITK,TEC,TXK
	SYK 家族成员	SYK,ZAP70

检测原理

实时定量荧光PCR即通过实时检测 PCR 每一个循环扩增产物相对应的荧光信号，来实现对起始模板进行定量及定性的分析，本实验采取荧光染料法，在 PCR 反应体系中，加入荧光染料，荧光染料特异性地掺入 DNA 双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。

产品介绍

PCR Array也被称作基因功能分类芯片或PCR阵列，它以96孔板或者384孔为载体，将目的基因引物固定在孔里，可同时定量、定性检测多个基因，具有高灵敏性和高特异性，是分析信号通路或某生物学功能相关基因表达状态的首选工具。

WCGENE® PCR ARRAY Plate含90个目的基因和4个内参基因，只需要将cDNA与qPCR MIX混匀，然后加入每个孔里，即可通过分析qPCR结果找到样品中差异表达的基因。具有重复性高，灵敏性强，操作便捷等特点。为实验研究者节省了预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程，可以直接了解不同信号通路或疾病中关键基因的差异情况。

流程图

操作步骤

1. 将样品提取RNA，并逆转成cDNA，样品要求如下（建议范围）：

RNA：	无明显降解，A260/A280比值应为1.8-2.0
cDNA：	严格按照所用试剂盒说明书操作
cDNA原液预实验内参范围：	ACTB或GAPDH的CT值：细胞15左右；组织18左右

*推荐使用Wcgene® mRNA cDNA kit合成cDNA

2. 板子使用前离心，2000r离心20 秒，离心结束后将封板膜小心撕掉。

3. 按照表a配制cDNA和mix混合液920μl，将配好的混合液混匀后按每个孔9μl量加板，加完后用透明封板膜封板，2000r离心20 秒，上机检测。

表a. cDNA和mix混合液配方表

组成成分	96孔 （搭配96孔板,每孔9 μl）
Wcgene® mRNA qPCR mix （2×）	510 μl
cDNA sample	100 μl
无RNA酶ddH2O	290 μl
ROX Reference Dye（50×）	20 μl
总体积	920 μl

4. 反应体系设置10μl，程序设置如表b所示

表b. PCR反应条件（WCGENE ® mRNA qPCR mix试剂盒为例）

循环		温度	时间
预变性	1	95℃	30 sec
变性	40	95℃	5 sec
退火延伸	40	60℃	30 sec
熔解曲线分析

 

5. 上机开始Real Time PCR反应

6. 结果导出，数据分析

芯片与适用的Real Time PCR仪（本品仅适用于订单所写机器型号）

Plate format	Instrument provider	qPCR instrument model
A (96 well)	Roche Applied Science	LC480
	Bio-rad	CFX96
B (96 well)	Applied Biosystems	7500， 7900HT， ViiA 7
C (96 well)	Applied Biosystems	7500 Fast System, 7900HT Fast System, StepOnePlus, ViiA 7 Fast System

参考文献

Zhu J J, Liu Y F, Zhang Y P, et al. VAMP3 and SNAP23 mediate the disturbed flow-induced endothelial microRNA secretion and smooth muscle hyperplasia[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2017, 114(31): 8271-8276.

Siqing Yue, Jie Yu, Yuan Kong, Haofeng Chen, Manfei Mao, Chenyang Ji, Shuai Shao, Jianqiang Zhu, Jinping Gu, Meirong Zhao,Metabolomic modulations of HepG2 cells exposed to bisphenol analogues,Environment International,Volume 129,2019,Pages 59-67,ISSN 0160-4120,

Zhao Y, Wang J, Xu C, et al. HEG1 indicates poor prognosis and promotes hepatocellular carcinoma invasion, metastasis, and EMT by activating Wnt/β-catenin signaling[J]. Clinical Science, 2019, 133(14): 1645-1662.