A rapid method of preparing complex organohalogen extracts from avian eggs: Applications to in vitro toxicogenomics screening

Doug Crump, Kim L. Williams, Suzanne Chiu, Luke Periard, Robert J. Letcher

DOI: 10.1002/etc.4364

研究背景

从含有不同浓度的有机卤素污染物（OHCs）的双冠鸬鹚（DCCO）蛋中收集和制备环境相关的提取物，使用体外生物测定法表征潜在影响。

 

研究方法

1. 从5个不同地点——大湖区：1）泥岛（MUD）；2）中姊妹岛（MSI）；3）汉密尔顿港（HAM）；4）斯特拉坎岛（STR）；非大湖地区：曼达特岛（Man）收集DCCO卵。

2. 用脂质冷冻 - 过滤提取方法来制备从具有可变OHC负荷的五组DCCO卵的提取物。

3. 分析五组样品264种OHC，包括：207个多氯联苯（PCB）同系物，18种多氯二苯并对二恶英（PCDDs）和二苯并呋喃（PCDFs），30种有机氯农药（OC）和9种多溴二苯醚（PBDE）同类物。

4. 将溶解在DMSO中的提取物施用于鸡胚胎肝细胞（CEH）。

5. 使用鸡ToxChip PCR芯片检测对细胞活力，7-乙氧基脱嘌呤-O-脱乙酰酶（EROD）活性和mRNA表达的影响

结果

1 DCCO蛋提取物的化学分析

5组样品具有不同的ohc浓度，具有较大OHC负荷的提取物，EROD EC 50值较低。MSI浓度最高，而非大湖区MAN浓度最低。在所有五个菌落中，化学类别的浓度等级顺序如下：

ΣPCBs - MSI> MUD> HAM> STR >> MAN; ΣOCs - MSI> MUD> HAM> STR> MAN; ΣPBDEs - MSI≈HAM> MUD> STR> MAN; 和ΣPCDD/ F TCDD毒性当量（TEQs）-MSI>HAM