南京大学客户发表文章——STAT3在抗病毒反应中的调节机制
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作者:wcgene
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发布时间: 2020-03-19
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细胞进行PCR芯片分析（a）感染期间的STAT3相关基因相对转录水平如热图所示。IL-10和IL-6被认为既是STAT3的激活剂又是靶标。（B）对每个组中差异表达的基因进行GO富集分析，百分比显示在饼图中。（C-G）感染后指定时间点验证STAT3靶基因倍数变化。（H-I）感染后指定时间点，STAT3调节因子倍数变化。
3.3 细胞STAT3正向调节EV71感染
通过特定的siRNA下调STAT3，以研究STAT3在EV71感染中的作用。细胞内敲除STAT3限制了EV71的复制，表明细胞STAT3在EV71复制中起正向调节作用。
图3. （a）STAT3基因敲除限制性病毒RNA水平。（B）STAT3敲低限制了EV71报告病毒的荧光素酶活性。（C）在STAT3 KD细胞中EV71的病毒滴度降低。（D）通过蛋白质印迹分析STAT3 KD T98G细胞中的EV71蛋白水平。还确定了STAT3的敲低效率。
3.4 STAT3敲除提高ISG在EV71感染细胞中的产生
用STAT3特异性siRNA转染T98G细胞并感染EV71时，干扰素刺激基因（ISG）的RNA表达和蛋白表达上调（图4B）。使用干扰素刺激反应元件（ISRE）荧光素酶报告系统分析ISRE活性的影响，并表明当细胞STAT3被敲低时EV71诱导的ISRE活性显着增加，表明STAT3负调控ISRE活性（图4C）。图4D表明STAT3对ISRE活性的限制仅与EV71感染有关。实时PCR分析进一步证实了IFNβ诱导的ISGs上调在STAT3抑制下保持不变（图4E）。STAT3基因敲除促进EV71感染T98G细胞ISG表达。
图4.（A）应用实时PCR技术检测EV71感染STAT3-KD-T98G细胞ISGs的mRNA水平（B）通过蛋白质印迹分析EV71感染后MxA和OAS1的蛋白水平。（C）STAT3敲低增加了EV71感染细胞的ISRE活性。在IFN-β处理的细胞中，（D）ISRE活性不受STAT3敲低的影响；（E）ISG mRNA的表达水平不受STAT3敲低的影响。
3.5 感染细胞中的STAT3敲低促进STAT1的核易位
在STAT3敲低的细胞中EV71诱导的STAT1的核易位减少。图5这些数据表明，细胞感染后pSTAT1 701
