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miR-100-5p-abundant exosomes derived from infrapatellar fat pad MSCs protect articular cartilage and ameliorate gait abnormalities via inhibition of mTOR in

osteoarthritis

Jiangyi Wu, Liang Kuang, Cheng Chen, Junjun Yang, Wei-Nan Zeng, Tao Li, Hao Chen, Shu Huang, Zhenlan Fu, Jiamiao Li, Renfeng Liu, Zhenhong Ni, Lin Chen, Liu

Yang

DOI:   https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2019.03.022

Biomaterials (IF=8.806)

研究背景

我们研究了髌下脂肪垫（IPFP）间充质干细胞（MSCs）的外泌体（MSCIPFP -Exos）在体外和体内对骨关节炎（OA）的作用和潜在机制。结果揭示一种治疗OA的新策略。

方法

从关节病患者细胞分离外泌体，WB鉴定外泌体。对小鼠进行关节炎诱导，制备样品，进行组织学分析，免疫组化分析，蛋白印迹分析，绿色荧光蛋白分析，PCR定量分析，双荧光素酶报告基因测定，qPCR定量分析（wcgene biotech，Shanghai，上海启因生物 ），miRNA文库构建和测序，以及小鼠步态分析，最后对数据进行综合分析。

结果

1.MSCsIPFP和MSCIPFP的分离与鉴定，结果说明人类髌下脂肪垫来源的MSCs可以产生大量的外泌体样小泡。

图1. （A）MSCsIPFP的分离流程图。 （B）MSCsIPFP显示出代表性的纺锤状形态。（C）MSCsIPFP 上细胞表面标志物的流式细胞术分析，蓝线代表同种型对照，红线代表测量的表面标志物。（D）MSCIPFP-Exos的分离示意图。（E）通过透射电子显微镜（TEM）观察到的MSCIPFP 8 -Exo的形态。（F）通过Nanosight