,b. JUN和c .SIRT2进行扩增曲线校准。标准cDNA的六个连续稀释液(1-200倍)。 校准曲线图(x轴log10,y轴C q值)具有线性回归趋势线和d .GAPDH,e. JUN和f. SIRT2的相关系数。 可以从校准曲线的斜率计算引物效率。
2. 镉对基因表达谱的影响
对氧化应激反应相关基因的影响
图3镉对与摄取和氧化应激反应相关的基因表达的影响。 将BEAS-2B细胞(a)或A549细胞(b)用CdCl 2处理24小时。
图4镉对抗氧化防御系统相关基因表达的影响。 BEAS-2B细胞用CdCl2处理8或24小时。
对与细胞周期调节和增殖相关的基因的影响
镉诱导生长促进和细胞周期调节基因,然而在不同时间点产生不同的模式。
图5.镉对细胞周期调控和增殖相关基因表达的影响。 BEAS-2B细胞用CdCl2处理8或24小时。
对凋亡相关基因的影响
镉通过调节编码内源级联因子的重要基因显示促凋亡信号传导。 在BEAS-2B和A549细胞中,编码促凋亡蛋白NOXA的基因PMAIP1都被诱导转录。 然而,两种细胞系中诱导强度不同。
图6.镉对细胞凋亡相关基因表达的影响。 将BEAS-2B细胞(a)或A549细胞(b)用CdCl 2处理8或24小时。
对DNA损伤反应和修复相关基因的影响
关于DNA损伤和DNA修复的基因,损伤基因DDIT3和GADD45A的转录水平高度升高,在24小时处理后,在BEAS-2B细胞中观察到更明显的作用。
图7.镉对DNA损伤反应相关基因表达的影响。 将BEAS-2B细胞(a)或A549细胞(b)用CdCl 2处理8或24小时。
图8.镉对DNA修复系统相关基因表达的影响。 将BEAS-2B细胞(a)或A549细胞(b)用CdCl 2处理8或24小时。
结论
高通量RT-qPCR有助于预测研究不足的物质的作用模式,可作为进一步研究蛋白质水平的基础,为深入研究感兴趣物质的分子相互作用提供全面的基础。高通量