使用PCRarray分析多不饱和脂肪酸对转运蛋白表达的影响
来源:
|
作者:wcgene
|
发布时间: 2020-03-13
|
76 次浏览
|
分享到:
文章标题： Analysis of the effects of polyunsaturated fatty acids on transporter expressions using a PCR array: Induction of xCT/SLC7A11 in human placental BeWo cells Kanako Ono，Ayako Furugen，Yuko Kurosawa，Naoko Jinno，Katsuya Narumi， Masaki Kobayashi， Ken Iseki 杂志：Placenta DOI：https://doi.org/10.1016/j.placenta.2018.11.010
研究背景： 多不饱和脂肪酸（PUFA），包括花生四烯酸（AA），二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA），对于胎儿生长至关重要。本研究的目的是阐明PUFA对胎盘转运蛋白表达和功能的影响，胎盘转运蛋白在胎盘功能中起重要作用，包括胎儿的营养供应，代谢物的排泄以及异生素对胎儿的保护。
方法 人胎盘绒毛膜癌BeWo细胞用作滋养层细胞模型。通过PCR array研究了PUFA诱导的84种转运蛋白的基因表达的改变。分别通过蛋白质印迹和摄取实验评估蛋白质水平和转运蛋白的活性。用怀孕的Wistar大鼠分析胎盘的转运蛋白表达。
结果 1.PUFAs对BeWo细胞活力和脂肪分化相关蛋白表达的影响 用MTT评估PUFA处理后的细胞活力。用AA，EPA或 DHA处理24小时不影响BeWo细胞的存活率（图1A）。我们的实验证实了PUFA对ADRP mRNA表达的影响：AA，EPA和DHA诱导ADRP mRNA的表达分别达到对照值的191％，169％和174％（图1B）。 
图1.用PUFA处理后的细胞活力（A）和ADRP mRNA表达（B）。用100μM的AA，EPA或DHA处理BeWo细胞24小时。 2.PCR数组分析PUFA对转运蛋白表达的影响 在本研究中，通过PCRarray评估BeWo细胞中84种转运蛋白基因的表达水平。未经PUFA处理（对照）的BeWo细胞的Ct值分布如图2A所示。在BeWo细胞中检测到PCRarray中大约70％的转运蛋白基因。20％的基因高度表达，28％是中间的，23％的基因表现出低表达水平。图2B和C显示对照样品中每种基因的表达水平与AA处理的（
