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1.研究背景

    具有EGF样结构域1（HEG1）的心脏发育蛋白在胚胎发育和血管生成中起关键作用，与肿瘤进展密切相关。但是，HEG1在肝细胞癌（HCC）中的作用仍然未知。本研究探讨了肝癌中HEG1的临床意义，生物学功能和调控机制。

2.方法

2.1 检测肝癌细胞和正常肝细胞L02中HEG1 mRNA水平和蛋白水平的表达

2.2 从肝癌患者获得肝细胞癌组织和癌旁非肿瘤肝组织(ANLTS)，通过免疫组化方法（IHC）将肝癌标本分为低表达组和高表达组

2.3 通过转染建立HEG 1高表达和HEG 1敲除的肝癌细胞模型，采用创伤愈合和transwell检测的方法研究这些细胞的迁移和侵袭能力

2.4 建立肝癌小鼠肿瘤模型

2.5 通过生物信息学方法（TCGA和KEGG数据库）和实验（信号通路芯片）分析HEG 1调控的信号通路

2.6 应用Wnt/β-catenin信号相关基因PCR芯片(Wcgene Biotech，上海启因生物)分析差异表达基因

2.7  免疫共沉淀研究HEG1结合的蛋白

3.结果

3.1 HEG 1在人肝癌细胞株和组织中的高表达，并预示肝癌患者预后不良

无论在L02和HCC细胞中还是肝细胞癌组织和正常肝组织中，mRNA水平，蛋白水平和数据库（TCGA和GEO）结果都一致表明，肝细胞癌中HEG 1的表达明显高于正常。使用训练组和验证组评估HEG1表达与HCC患者的临床病理特征和存活率之间的关系。这些结果充分证明，HEG1与不良的生存密切相关，可以作为新的肝癌预后生物标志物。

图1. HEG1表达在HCC细胞系和组织中显着上调，并且与不良预后密切相关

qRT-PCR和Western blot分别鉴定了（A）八种HCC细胞系和L02细胞中HEG1的mRNA和蛋白表达水平和（B）在30对配对的新鲜HCC组织和ANLT中检测到HEG1 mRNA和蛋白表达水平。（C）肝癌，转移瘤和ANLT样品中HEG1表达的代表性IHC图像。（D）训练组和（E）验证组中HEG1差异表达的